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【關(guān)鍵詞】 上消化道出血; 老年人;病因
上消化道出血(upper gastrointestinal hemorrage，UGH)是指屈氏韌帶以上的食管、胃、十二指腸和胃空腸吻合術(shù)后的空腸上段和胰、膽等病變引起的出血[1]，是消化內(nèi)科的急癥。由于老年患者特有的身體特點(diǎn)，老年上消化道出血的原因、臨床表現(xiàn)及預(yù)后與青年患者有所不同。回顧性分析本院2007年1月至2009年1月共收治上消化道出血老年患者經(jīng)胃鏡確診者60例，現(xiàn)報(bào)告如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料 本組60例患者，男38例，女22例，年齡60~81歲，平均72.6歲。60例患者根據(jù)嘔血、便血的臨床表現(xiàn)，大便潛血試驗(yàn)陽性，全部病例均經(jīng)胃鏡或上消化道鋇餐透視檢查診斷確診，全部符合上消化道出血診斷標(biāo)準(zhǔn)，并排除下消化道出血。
1.2 臨床癥狀入院時(shí)有嘔血、黑糞和(或)便血，大便潛血陽性，排除來自口、鼻、咽部及呼吸道出血，其中黑便34例，嘔血8例，黑便+嘔血13例，便血7例。估計(jì)出血量1000 m12例， 4例患者出現(xiàn)失血性休克。22例在24 h內(nèi)就診，其余多在3 d內(nèi)就診。
1.3 治療方法本組主要采用內(nèi)科保守治療，患者入院后均絕對臥床休息，通過補(bǔ)充血容量、輸全血或紅細(xì)胞懸液，靜脈應(yīng)用質(zhì)子泵抑制劑如奧美拉唑等。對于出血量大者可以使用垂體后葉素收縮內(nèi)臟血管，降低門脈及側(cè)支循環(huán)壓力，如果有禁忌證可選用生長抑素類藥物如醋酸身曲肽注射液(善寧)等。同時(shí)對合并慢性疾病者給予相應(yīng)治療。經(jīng)內(nèi)科治療48 h后無效而且出血加重的患者可考慮進(jìn)行手術(shù)治療。
2 結(jié)果
本組老年人上消化道出血的病因?yàn)槭改c潰瘍18例，胃潰瘍16例，肝硬化食管胃底靜脈曲張破裂出血7例，復(fù)合潰瘍6例。腫瘤7例，其他5例，1例未行胃鏡檢查，自動(dòng)出院，未能明確診斷。老年組復(fù)合潰瘍、胃潰瘍、腫瘤高于非老年組(P
3 討論
在老年人上消化道出血的病因中，仍以消化性潰瘍占首位、特別是胃潰瘍多見，十二指腸潰瘍所占比例明顯下降;而中青年組十二指腸潰瘍明顯多于胃潰瘍，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[2]。老年人胃潰瘍增多的原因可能與老年人胃黏膜呈退行性變，血供不足致營養(yǎng)不良，分泌功能低下，使胃黏膜上皮細(xì)胞修復(fù)功能受損，胃黏膜屏障功能減退;胃黏膜的營養(yǎng)因子如胃泌素、表皮生長因子等的減少， 胃腔內(nèi)H+濃度明顯增高會(huì)使其反彌散增多，胃黏膜屏障功能受損，致其防御能力減退有關(guān)[3，4]。同時(shí)，老年人動(dòng)脈硬化等引起胃黏膜血流量減少，影響?zhàn)つさ脑偕迯?fù)亦是其原因之一。老年人常因其他疾病長期服用非甾體類藥物，對胃黏膜有明顯損害，非甾體類藥物致胃腸出血可能與以下因素有關(guān):① 抑制環(huán)氧化酶-1的活性，減少前列腺素的合成;②抑制血栓素A2的合成，使血小板聚集減少，誘發(fā)出血;③ 異常增多的白三烯及氧自由基對黏膜有毒性作用;④削弱胃黏膜屏障，影響上皮細(xì)胞的修復(fù)功能;所以老年人尤其是有胃腸疾病者應(yīng)慎用非甾體類藥物，必要時(shí)可同時(shí)服用抑酸類藥或胃黏膜保護(hù)劑以進(jìn)行預(yù)防，警惕出血情況的出現(xiàn)。
急診胃鏡對上消化道出血的意義重大，不但可確定有無活動(dòng)性出血，還可對選擇處理方法有指導(dǎo)意義[5]。急性胃黏膜病變診斷在急診胃鏡檢查前非常困難，因病變淺，能在短時(shí)間內(nèi)愈合，應(yīng)用常規(guī)胃鏡檢查難以發(fā)現(xiàn)這種病變，急診胃鏡開展使急性胃黏膜病變診斷率顯著提高。此外，急診胃鏡檢查對選擇處理上有指導(dǎo)意義，當(dāng)發(fā)現(xiàn)出血病灶為癌腫引起者，需轉(zhuǎn)外科治療，但對急性胃黏膜病變多數(shù)用內(nèi)科治療，可鏡下止血，如噴灑止血藥物凝血酶等，常能很快控制出血。老年人上消化道出血，特別是合并有其他疾病或由其他原發(fā)病所致者，故治療上應(yīng)采取綜合治療措施，在病因診斷及治療的同時(shí)，應(yīng)緊急處理上消化道出血。內(nèi)科治療主要是補(bǔ)充血容量，控制出血和再出血，及時(shí)輸血輸液，以維持有效血液循環(huán)量。凡受體阻滯劑甲氰咪呱和立止血對老年上消化道出血可作為首選藥物，胃鏡下使用去甲腎上腺素冰鹽水灌洗后局部噴灑凝血酶療效肯定，值得在基層醫(yī)院推廣。
參 考 文 獻(xiàn)
[1] 鄭芝田.胃腸病學(xué).人民衛(wèi)生出版社，2006:301-307.
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[3] 葉任高，陸再英，謝毅，等.內(nèi)科學(xué).人民衛(wèi)生出版社，2005:480.
【摘要】 目的 對亞洲牛帶絳蟲成蟲延伸因子-1(elongation factor 1， EF-1)基因進(jìn)行克隆、表達(dá)和免疫學(xué)初步研究。方法 將亞洲牛帶絳蟲成蟲EF-1克隆到原核表達(dá)質(zhì)粒pET-28a(+)中，在大腸桿菌BL-21/DE3中用異丙硫代-β-D半乳糖苷誘導(dǎo)表達(dá)，表達(dá)產(chǎn)物通過十二烷基磺酸鈉－聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)進(jìn)行鑒定，用鎳離子金屬螯合劑親和層析柱進(jìn)行純化，用蛋白印跡法(Western blotting)進(jìn)行免疫學(xué)分析。結(jié)果 PCR、雙酶切及DNA測序結(jié)果均表明重組質(zhì)粒pET-28a(+)-EF-1構(gòu)建成功。重組蛋白可被感染了亞洲牛帶絳蟲患者血清和豬血清識(shí)別，表明其具有免疫反應(yīng)性。結(jié)論 亞洲牛帶絳蟲成蟲EF-1基因可在原核表達(dá)系統(tǒng)中獲得具有免疫學(xué)活性的表達(dá)，為進(jìn)一步研究該蛋白的功能奠定了基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】 亞洲牛帶絳蟲；延伸因子-1；基因克隆；原核表達(dá)
ABSTRACT: Objective To clone and express the novel gene named elongation factor 1 (EF-1) of Taenia saginata asiatica in order to analyze the immunogenicity of the recombinant protein. Methods By screening the full length cDNA plasmid library， the coding region of EF-1 was amplified with PCR， and cloned into the prokaryotic expression vector pET-28a(+) and then expressed in E.coli BL21 with IPTG induction. The recombinant protein was detected by SDS-PAGE and purified by Ni-IDA affinity chromatography， and its immunogenicity was analyzed by Western blotting. Results PCR， double enzyme digestion and DNA sequencing confirmed that the recombinant expression plasmid was successfully constructed. Western blot analysis of EF-1 recombinant protein testified that the recombinant protein could be recognized by immunizing the serum of swine and patient， therefore indicating its immunogenicity. Conclusion A novel gene coding EF-1 of Taenia saginata asiatica was cloned and expressed successfully. The purified protein of EF-1 will be of importance for further research on the biological function of the gene.
KEY WORDS: Taenia saginata asiatica; elongation factor 1(EF-1); molecular cloning; prokaryotic expression
亞洲牛帶絳蟲(Taenia saginata asiatica)是近30年來發(fā)現(xiàn)的一種成蟲形態(tài)與牛帶絳蟲相似，而囊尾蚴卻與豬囊尾蚴相似并以豬作為中間宿主的人體帶絳蟲。2006年我們在前期研究的基礎(chǔ)上進(jìn)一步系統(tǒng)地開展對亞洲牛帶絳蟲在分類地位、分子診斷和疫苗等方面的研究［1-4］，為制定預(yù)防人體帶絳蟲病策略提供依據(jù)。本研究從亞洲牛帶絳蟲成蟲cDNA質(zhì)粒文庫中篩選出一個(gè)延伸因子-1(elongation factor 1， EF-1)的同源基因，構(gòu)建了pET-28a(+)-EF-1原核表達(dá)載體，并對其原核表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行了初步的免疫學(xué)研究，為進(jìn)一步研究其生物學(xué)功能奠定基礎(chǔ)。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 血清來源
感染亞洲牛帶絳蟲豬血清由貴陽醫(yī)學(xué)院寄生蟲學(xué)教研室提供，患者血清采自亞洲牛帶絳蟲流行區(qū)貴州省都勻市米秀鄉(xiāng)，健康人血清由中山大學(xué)熱帶病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室提供。
1.1.2 文庫、質(zhì)粒、菌株
蟲體標(biāo)本采自亞洲牛帶絳蟲流行區(qū)貴州省都勻市米秀鄉(xiāng)，亞洲牛帶絳蟲成蟲全長cDNA質(zhì)粒文庫的構(gòu)建、EST測序及Unigene 分析與上海聯(lián)合基因有限公司合作完成。原核表達(dá)質(zhì)粒pET-28a(+)和大腸桿菌BL-21/DE3由中山醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室保存。
1.1.3 主要試劑和工具酶
Ex Taq酶(含dNTP)、EcoRⅠ、XhoⅠ、T4 DNA連接酶及DNA標(biāo)準(zhǔn)(DL2000)均購自大連寶生物工程公司；異丙硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)購自美國Promega公司；Ni-IDA Agarose(cat No：69670)購自美國Novagen公司；蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)購自立陶宛MBI公司；DNA凝膠回收試劑盒、質(zhì)粒純化試劑盒購自北京賽百盛基因公司；辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗豬IgG二抗、DAB(3，3二氨基聯(lián)苯胺)顯色試劑盒均購自武漢博士德有限公司；PVDF膜購自Millipore公司；TMB顯色試劑盒購自美國BD公司；SDS、丙烯酰胺、亞甲叉雙丙烯酰胺、過硫酸胺、尿素等試劑均購自上海申友生物科技公司。
1.1.4 引物合成和DNA測序
基因擴(kuò)增引物和重組質(zhì)粒DNA測序由Invitrogen上海生物技術(shù)有限公司合成。
1.2 方法
1.2.1 EF-1基因的識(shí)別
將獲得的亞洲牛帶絳蟲unigene進(jìn)行Blastx分析，獲得編碼亞洲帶絳蟲成蟲延伸因子-1基因文庫質(zhì)粒編號(hào)為T.a HC23-E9，GenBank登錄號(hào)為EF420501的同源基因；并通過瑞士生物信息學(xué)研究所的蛋白分析專家系統(tǒng)(ExPASY， ca.expasy.org/)預(yù)測其理化特性。
1.2.2 EF-1基因的擴(kuò)增 根據(jù)已獲得的EF-1編碼序列，利用DNAClub和PCRdesign設(shè)計(jì)引物。上游引物：CTAGAATTCATGGAGTGTGCGTTGAAGTTC，帶EcoRⅠ酶切位點(diǎn)；下游引物：GGGCTCGAGTTACAATTTGTTGAAGGAAG，帶XhoⅠ酶切位點(diǎn)。以亞洲牛帶絳蟲成蟲cDNA文庫中EF-1基因的克隆質(zhì)粒為模板，94 ℃預(yù)變性5 min后，熱循環(huán)參數(shù)為94 ℃ 1 min，57 ℃ 1 min，72 ℃ 1 min，共35個(gè)循環(huán)，最后72 ℃延伸10 min。PCR產(chǎn)物10 g/L瓊脂糖凝膠電泳回收。
1.2.3 重組原核表達(dá)質(zhì)粒［pET-28a(+)-EF-1］的構(gòu)建及鑒定
將PCR產(chǎn)物和原核表達(dá)質(zhì)粒pET-28a(+)經(jīng)EcoRⅠ、XhoⅠ雙酶切后回收，連接、轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL-21/DE3感受態(tài)細(xì)胞，卡那霉素篩選陽性克隆。對陽性克隆提取質(zhì)粒進(jìn)行PCR、雙酶切和測序鑒定。
1.2.4 重組蛋白的表達(dá)
將確定能表達(dá)重組蛋白的單菌落接種于5 mL LB培養(yǎng)基中，過夜培養(yǎng)后1∶100轉(zhuǎn)接到1 000 mL培養(yǎng)基中，培養(yǎng)至A600約為0.6時(shí)加入IPTG至終濃度為1 mmol/L，28 ℃、250 r/min進(jìn)行誘導(dǎo)。誘導(dǎo)4 h后離心收菌，用SDS-PAGE檢測蛋白質(zhì)的表達(dá)。
1.2.5 菌體的裂解、重組蛋白可溶性判斷及待純化融合蛋白上清的制備
取單菌落接種于1 000 mL含卡那霉素的LB培養(yǎng)基中，37 ℃震蕩培養(yǎng)至A600為0.6時(shí)，加入IPTG使其終濃度為1 mmol/L，28 ℃震蕩培養(yǎng)4 h，4 ℃離心(6 000 g×10 min)，收集菌液，按文獻(xiàn)［5］的方法，每克菌(濕重)加入3 mL裂解緩沖液，重懸細(xì)菌沉淀，裂解液冰上超聲破碎(160 W，超聲1 s，停2 s，超聲5 min)，4 ℃ 13 000r/min離心20 min，收集上清和沉淀，分別取上清10 μL加入4×SDS上樣緩沖液和沉淀微量加1×SDS上樣緩沖液，煮沸5-10 min后行150 g/L SDS-PAGE判斷重組蛋白的可溶性。
1.2.6 尿素變性純化重組蛋白
在得到的包涵體(超聲后沉淀)中加入A液10 mL重懸，4 ℃ 12 000 r/min離心15 min，棄上清，重復(fù)2次，再用B液洗滌1次，4 ℃ 6 000 r/min離心15 min。將洗滌后的包涵體沉淀加入8 mol/L尿素(溶于基礎(chǔ)液)18 mL放置1 h左右，沉淀完全溶解，溶液清亮透明。采用透析法，逐步降低尿素濃度(8-6-5-4-3-2-1 mol/L PBS溶液)。
1.2.7 Western blotting檢測重組蛋白的免疫反應(yīng)性
將純化的蛋白進(jìn)行120 g/L SDS-PAGE電泳，使用電轉(zhuǎn)移儀于100 V冰浴轉(zhuǎn)印1.5 h，將蛋白轉(zhuǎn)移至PVDF膜上，將含預(yù)染蛋白Marker條帶剪下，PVDF膜轉(zhuǎn)入感染亞洲牛帶絳蟲豬和患者血清中(1∶100稀釋)，室溫孵育2 h，PBS洗滌3次，每次5 min。然后加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗豬和抗人IgG(1∶2 000稀釋)，室溫孵育1 h，PBS洗滌3次，每次5 min，DAB顯色至出現(xiàn)目的條帶，超純水終止反應(yīng)［6］。
2 結(jié) 果
2.1 生物信息學(xué)分析
該基因與細(xì)粒棘球絳蟲EF-1基因(登錄號(hào)為AAF641192.1)的氨基酸序列的一致性達(dá)87%，相似性達(dá)91%；全長988 bp，編碼區(qū)67-868，編碼269個(gè)氨基酸。理論分子質(zhì)量和等電點(diǎn)分別是28 067.8 u和4.88［7］。
2.2 原核重組質(zhì)粒的鑒定
將重組質(zhì)粒進(jìn)行PCR和雙酶切鑒定，產(chǎn)物進(jìn)行10 g/L瓊脂糖凝膠電泳。結(jié)果顯示在500-1 000 bp之間有一清晰的條帶，與目的基因的大小基本相符，證明重組質(zhì)粒構(gòu)建成功(圖1)。
2.3 蛋白表達(dá)純化結(jié)果
將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化到E.Coli BL-21/DE3中表達(dá)，SDS-PAGE電泳分析結(jié)果如圖2中第4、5泳道所示，大約在34 ku左右處出現(xiàn)表達(dá)條帶，與目的蛋白分子量基本相符。通過破包涵體，將蛋白進(jìn)行純化，結(jié)果如圖2中第6、7泳道所示，其位置與目的蛋白相符，證明目的蛋白純化成功。
2.4 Western blotting鑒定
感染亞洲牛帶絳蟲的豬血清以及感染亞洲牛帶絳蟲的患者血清對純化蛋白的Western blotting均顯示出清晰的條帶(圖3)。
3 討論
研究表明，EF-1是一種在細(xì)胞內(nèi)普遍存在且大量表達(dá)的多聚體核糖體蛋白質(zhì)，在基因表達(dá)、翻譯過程中起重要作用［8］。EF-1可能由α、β、γ、δ四個(gè)亞基組成，其中EF-1α屬于G蛋白家族，它和氨酰tRNA、GTP一起組成復(fù)合體，通過正確地識(shí)別mRNA上的密碼子和tRNA上的反密碼子，負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)運(yùn)氨酰tRNA 到80S核糖體，并具有低水平GTP酶的活性。EF-1β具有鳥苷酸交換活性，在EF-1α從核糖體離開并且構(gòu)象由GDP形式變成GTP準(zhǔn)備與新的AA-tRNA相互作用的過程中，需要EF-1β作為催化劑。EF-1γ常與EF-1β形成復(fù)合物，具有增加后者鳥苷酸交換的功能。至少在脊椎動(dòng)物中，EF-1還有第四個(gè)亞基EF-1δ，尤其在其羧基端與EF-1β具有同源性，而在氨基端無同源性，表明它們可能具有不同的功能［9-10］。我們從亞洲牛帶絳蟲cDNA文庫中識(shí)別出了一個(gè)EF-1的全長編碼基因，其編碼的氨基酸序列與GenBank中細(xì)粒棘球絳蟲的EF-1基因 (登錄號(hào)為AAF64192.1)的氨基酸序列的一致性達(dá)87%，相似性達(dá)91%，推測其為亞洲牛帶絳蟲EF-1基因，并且含有完整的開放閱讀框，是一個(gè)全長cDNA序列。
通過生物信息學(xué)分析，該蛋白的理論分子質(zhì)量為28 067.8 u，而質(zhì)粒pET-28a(+)的載體標(biāo)簽序列的分子質(zhì)量為6 ku，所以重組蛋白的分子質(zhì)量大約應(yīng)為34 ku。圖2的4泳道顯示的重組蛋白條帶與預(yù)期的大小是一致的，并且條帶很濃，但從該圖的5泳道看出上清沒有表達(dá)，說明該蛋白是以包涵體的形式表達(dá)，通過尿素變性純化重組蛋白，得到了條帶很濃的純化蛋白(圖2第7泳道)。本研究為包涵體蛋白的純化積累了經(jīng)驗(yàn)，同時(shí)還證實(shí)了重組蛋白在純化后具有免疫反應(yīng)性，獲得了具有免疫活性的重組蛋白，為進(jìn)一步研究其生物學(xué)功能以及在診斷尤其是疫苗研究方面的作用奠定了基礎(chǔ)。
參考文獻(xiàn)
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關(guān)鍵詞：硫化橡膠 邵氏硬度 拉伸性能
中圖分類號(hào)：TQ330 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1672-3791（2014）05（b）-0229-02
橡膠制品在現(xiàn)代工業(yè)中的應(yīng)用廣泛，在試驗(yàn)工作中對于橡膠物理力學(xué)性能就會(huì)嚴(yán)格要求其達(dá)到相應(yīng)指標(biāo)。為了了解其力學(xué)性能，控制和調(diào)整生產(chǎn)工藝及評(píng)定產(chǎn)品的達(dá)標(biāo)情況和硫化情況，設(shè)計(jì)邵氏硬度和拉伸性能都是橡膠物理性能試驗(yàn)中重要的必不可少的項(xiàng)目。并且在試驗(yàn)中減少影響試驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的無法避免的不利因素，這是十分必要的。本文結(jié)合三種樣品的試驗(yàn)，就影響硫化橡膠的邵氏硬度和拉伸性能試驗(yàn)結(jié)果的主要因素及其原因進(jìn)行了分析。
1 試驗(yàn)及結(jié)果分析
1.1 影響邵氏硬度試驗(yàn)結(jié)果的因素
（1）試樣厚度。邵爾A型硬度值（以下簡稱硬度值）是由壓針壓入試運(yùn)行的深度來測定的，因此試樣的厚度直接影響試驗(yàn)結(jié)果。圖1是材料為SBR的膠料試樣在不同厚度下測得的不同數(shù)值的邵氏硬度。
由圖1可見，試樣厚度越薄其硬度值得紀(jì)念就越大，隨著試運(yùn)行厚度的逐漸增大，其硬度值也隨之逐漸變小。原因是，當(dāng)壓針壓入試樣，試樣受到壓力后變形，受壓的部分變薄，對于過薄的試樣，此時(shí)部分壓力直接施加于試臺(tái)上，因而壓入試樣的深度減小，硬度值增大。所以在GB/T 531-1999中規(guī)定了進(jìn)行邵氏硬度試驗(yàn)的樣品厚度為6 mm。
（2）讀數(shù)時(shí)間。在測量邵氏硬度時(shí)，讀數(shù)時(shí)間對試驗(yàn)結(jié)果的影響很大。有些比較陳舊的硬度計(jì)采用的是指針式讀數(shù)，而壓針受壓后立即讀數(shù)與指針穩(wěn)定后讀數(shù)，兩者之間的差異很大，特別是在某些合成橡膠中就更為明顯了。表1是EPDM膠料壓針壓下后的不同時(shí)刻讀數(shù)的數(shù)值。
由表1可以看出，立即讀數(shù)與指針穩(wěn)定后讀數(shù)，兩者之間的硬度值相差達(dá)5HA。所以對于一些沒有數(shù)顯裝置的硬度計(jì)來說，如何正確讀數(shù)，縮短讀數(shù)時(shí)間的差異對試驗(yàn)結(jié)果就顯得非常重要了。
（3）停放時(shí)間和環(huán)境溫度。在GB/T 531-1999標(biāo)準(zhǔn)中，要求橡膠進(jìn)行硬度試驗(yàn)前試運(yùn)行的調(diào)節(jié)時(shí)間不得少于3 h；而硫化與試驗(yàn)之間的時(shí)間間隔為16 h至3個(gè)月。若停放時(shí)間過長，往往造成硬度值增加，其增加的數(shù)值隨時(shí)間長短不同而不等，某些橡膠的HA值變化量達(dá)2-4。其原因是隨著停業(yè)的增加，橡膠試樣在環(huán)境溫度、濕度、光照和空氣流動(dòng)等方面因素的影響下，不斷進(jìn)行著相當(dāng)于老化試驗(yàn)的過程，而使得硬度值上升。
溫度對試驗(yàn)結(jié)果也有影響。橡膠為高分子材料，其硬度值隨環(huán)境溫度變化而變化，溫度高則影響程度也不同，對于一些結(jié)晶比較慢的天然橡膠，溫度對其影響小些；而對于氯丁橡膠、丁苯橡膠影響則相對比較顯著。
（4）其它因素。另外還有一些因素也將影響到試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，比如壓針楞角磨損、壓針壓入時(shí)沒有與被測試試驗(yàn)面垂直等。無論是其中的一項(xiàng)或多項(xiàng)，都將造成較大的試驗(yàn)誤差。所以，當(dāng)了解了影響硬度試驗(yàn)結(jié)果的因素后，就應(yīng)該盡可能地避免這些因素的影響，提高試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
1.2 影響拉伸性能試驗(yàn)結(jié)果的因素
（1）試樣寬度。在橡膠的拉伸試驗(yàn)中，一般采用啞鈴狀試樣。在GB/T 528-1999中規(guī)定了幾種不同的裁刀尺寸規(guī)格，工作部分寬度不同，試驗(yàn)結(jié)果也不同，而對于不同寬度下測得的試驗(yàn)結(jié)果，一般沒有可比性。但一般而言，工作寬度增加，拉伸強(qiáng)度和扯斷伸長率都有所降低。見表2。
產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因可能是：①膠料中存在微觀缺陷，這些缺陷經(jīng)過混煉并沒有被消除，只是分布均勻了些，仍存在于膠料之中，所以面積越大存在這些缺陷的機(jī)率也越大。②試驗(yàn)過程中工作部分寬度存在受力不均勻。寬度方向上邊緣部分的毅力大于中間部分的應(yīng)力，寬度越寬，差異也就越大。這也是造成早期斷裂的一種原因。
（2）試樣厚度。在進(jìn)行拉伸試驗(yàn)時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的試運(yùn)行厚度為2.0±0.3 mm，但隨著試樣厚度的增加，拉伸強(qiáng)度和扯斷伸長率都有所下降。分析其原因有：①厚度增加，使工作部分橫截面積增加，受力時(shí)使試樣邊緣和中心的受力不均情況也增加，從而使拉伸強(qiáng)度和扯斷伸長率下降。②由于橡膠試片在壓制過程中，模具本身存在缺陷，從而使試片的厚度有超差，在這種情況下制取試樣，截取的試樣斷面現(xiàn)狀會(huì)產(chǎn)生變形。由于試樣厚度增加，試片在受到裁刀壓力后產(chǎn)生變形，使截得的試運(yùn)行中凹進(jìn)去而使截面積減小。試樣越厚，斷面的變形就越大，截面積就越小，所測得的拉伸強(qiáng)度和扯斷伸長率當(dāng)然也就小了。因此，在壓制試片時(shí)，應(yīng)盡量提高試樣厚度的尺寸精度，從而減小試樣厚度對試驗(yàn)結(jié)果的影響。
（3）拉伸速度。硫化橡膠在進(jìn)行拉伸試驗(yàn)時(shí)，標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的拉伸強(qiáng)度為500±50 mm/min，但標(biāo)準(zhǔn)中也允許采用200±20 mm/min作為拉伸速度的。由試驗(yàn)得出，當(dāng)速度在200～500 mm/min之間時(shí)，速度對試驗(yàn)結(jié)果的影響并不顯著，但當(dāng)拉伸速度過慢或過快，則會(huì)對試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生較大的影響。圖2是以四種不同速度對EPDM膠料進(jìn)行了的試驗(yàn)情況。一般而言，速度增加，松弛產(chǎn)生影響的時(shí)間就短，由松弛引起的應(yīng)力減少就小，所以拉伸強(qiáng)度就提高，反之則下降。
（4）壓延方向。對硫化橡膠取樣，應(yīng)注意壓延方向。在GB/T 528-1999標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定，片狀試樣在拉伸時(shí)，其受力方向應(yīng)與壓延方向一致，否則其試驗(yàn)結(jié)果顯著降低（見表3）。
由表3中的試驗(yàn)數(shù)據(jù)可以看出，平行于壓延方向的拉伸強(qiáng)度比垂直于壓延方向的拉伸強(qiáng)度高。產(chǎn)生這一現(xiàn)象的原因可能是膠料在混煉時(shí)受到一定的剪切應(yīng)力，順輥筒方向分子鏈排列整齊，相當(dāng)于對分子進(jìn)行一次取向，所以平行于壓延方向的拉伸強(qiáng)度要比垂直壓延方向時(shí)得到的結(jié)果要大。
（5）停放時(shí)間。GB/T 3941-1991標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定，硫化后的橡膠試樣必須在室溫中停放一段時(shí)間后才能進(jìn)行試驗(yàn)，停放時(shí)間不得少于16 h最多不得超過15 d（天），否則對試驗(yàn)結(jié)果會(huì)有影響。隨著停放時(shí)間的延長，拉伸強(qiáng)度和扯斷伸長率會(huì)稍稍提高，但影響不十分明顯。其原因是停放一定時(shí)間后，可使試運(yùn)行在加工過程中產(chǎn)生的內(nèi)應(yīng)力趨向均勻分布，減小以至消失，因而在拉伸過程中，試樣受力均勻，不致因?yàn)槭艿綉?yīng)力集中影響而提早斷裂。
2 結(jié)語
從硬度和拉伸性能兩方面品影響硫化橡膠力學(xué)性能試驗(yàn)結(jié)果的幾個(gè)因素，并簡要分析了原因。當(dāng)然還有其它因素也會(huì)對最終試驗(yàn)結(jié)果造成影響，本文的目的是通過了解這些內(nèi)容，避免一些試驗(yàn)誤差的產(chǎn)生，從而提高試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
參考文獻(xiàn)
關(guān)鍵詞：英語學(xué)習(xí)兩極分化原因?qū)Σ?/p>
義務(wù)教育英語課程標(biāo)準(zhǔn)指出：“英語課程要面向全體學(xué)生，關(guān)注語言學(xué)習(xí)者的不同特點(diǎn)和個(gè)體差異。”這是英語課程標(biāo)準(zhǔn)的基本理念，也是素質(zhì)教育的出發(fā)點(diǎn)。但由于各種原因，學(xué)生進(jìn)入初中后，越來越多的學(xué)生開始對英語學(xué)習(xí)不感興趣，學(xué)習(xí)態(tài)度不端正，成績越來越差；而另有少數(shù)學(xué)生則學(xué)習(xí)興趣濃厚，學(xué)習(xí)輕松且成績優(yōu)良，兩極分化不斷加大。如何處理解決好這一問題，是學(xué)生以后能否繼續(xù)學(xué)好英語的關(guān)鍵。
一、兩極分化的形成原因
兩極分化的現(xiàn)象在七年級(jí)的上學(xué)期就已經(jīng)出現(xiàn)了，造成學(xué)生學(xué)習(xí)英語積極性不高，出現(xiàn)兩極分化的主要原因大致有以下四種：
1.教材的變化
初一新教材與老教材相比跨度大，語言覆蓋面廣，詞匯量大，練習(xí)里常出現(xiàn)許多生詞，一些學(xué)生在小學(xué)基礎(chǔ)不好，要想跟上就更難了。
2.學(xué)生的學(xué)習(xí)方法
（1）學(xué)習(xí)不得法。例如：學(xué)生音標(biāo)不認(rèn)得，念單詞用漢字注音，有些學(xué)生仍然是和漢語連在一起，記生詞靠死記硬背，學(xué)語法死搬硬套，練習(xí)句型生吞活剝，寫句子逐詞對譯，始終擺不脫漢語習(xí)慣。
（2）缺乏足夠的毅力、恒心。很多學(xué)生學(xué)習(xí)英語有很大的盲目性和隨意性。他們學(xué)英語只是新鮮一陣，覺得這門課好像很有意思，一遇困難挫折就喪失信心和興趣，逐漸就不學(xué)了。
3.教師的教學(xué)方法
教師授課時(shí)不重視教學(xué)內(nèi)容和形式的設(shè)計(jì)，采取“滿堂灌”的方法，側(cè)重教授學(xué)生知識(shí)，忽視指導(dǎo)學(xué)生掌握學(xué)習(xí)策略。長期如此，學(xué)生對學(xué)習(xí)失去興趣，在課堂上由于信心不足而不敢開口說英語，往往又被教師忽視，導(dǎo)致惡性循環(huán)。
二、避免兩極分化的幾點(diǎn)對策
（一）、學(xué)生方面
1.培養(yǎng)學(xué)習(xí)興趣
（1）興趣是最好的老師。缺乏興趣，學(xué)生只能被迫去學(xué)，根本談不上創(chuàng)造學(xué)習(xí)。要把學(xué)生從“要我學(xué)”轉(zhuǎn)變?yōu)椤拔乙獙W(xué)”就需要教師持續(xù)不斷地激發(fā)和培養(yǎng)學(xué)生學(xué)習(xí)英語的興趣。教師要注意教學(xué)的生動(dòng)性和趣味性，使課堂教學(xué)生動(dòng)活潑，讓學(xué)生扮演各角色，相互對話，講故事，表演短劇節(jié)目。教師還要善于利用實(shí)物、卡片、圖表、圖片、身勢語言，創(chuàng)設(shè)生動(dòng)形象化的情景；播放英語歌、做游戲、猜謎、搞競賽等活動(dòng)。通過這些活動(dòng)激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)熱情。時(shí)間一久，這些興趣就會(huì)轉(zhuǎn)化為強(qiáng)大內(nèi)部學(xué)習(xí)動(dòng)機(jī)。使學(xué)生進(jìn)行自覺、自主、有創(chuàng)造思維的學(xué)習(xí)。
（2）多為學(xué)生創(chuàng)造學(xué)習(xí)成就感。教師通過各種方式，激勵(lì)學(xué)生的成就感和進(jìn)取精神，因材施教，因人而異。著重引導(dǎo)學(xué)生積極思考，敢回答，對后進(jìn)生不能回答時(shí)應(yīng)耐心鼓勵(lì)說“Try again”、“Don’t worry， Take it easy.”、“I think you can do it will next time.”，使不同學(xué)生都能體驗(yàn)成功喜悅和自身價(jià)值，對學(xué)生消極情緒，思想顧慮和精神負(fù)擔(dān)要給予耐心指導(dǎo)幫助。
2.養(yǎng)成良好的學(xué)習(xí)習(xí)慣和科學(xué)的學(xué)習(xí)方法
（1）要養(yǎng)成預(yù)復(fù)習(xí)的習(xí)慣。在預(yù)復(fù)習(xí)的過程中，學(xué)生要敢于發(fā)現(xiàn)問題，并自己努力想辦法解決問題。預(yù)習(xí)新知使學(xué)生獲得所學(xué)知識(shí)的心理準(zhǔn)備，而復(fù)習(xí)舊知?jiǎng)t能加深學(xué)生對重難點(diǎn)的認(rèn)識(shí)，對學(xué)生長期的英語學(xué)有裨益。
（2）循序漸進(jìn)，一點(diǎn)一滴積累。在學(xué)習(xí)過程中不急躁不貪心，掌握一點(diǎn)是一點(diǎn)。
（3）多讀，多聽，多講，多寫，找內(nèi)容有知識(shí)性，趣味性，娛樂性的英語資料。
（二）、教師方面
1.改進(jìn)教學(xué)方法和手段
（1）改進(jìn)備課方法。教師的備課應(yīng)該在認(rèn)真鉆研教材的基礎(chǔ)上從學(xué)生的實(shí)際學(xué)情出發(fā)，確定符合他們認(rèn)知特點(diǎn)的教學(xué)目標(biāo)，既包括基礎(chǔ)知識(shí)和基本技能方面的目標(biāo)，也包括培養(yǎng)學(xué)生綜合能力的目標(biāo)；準(zhǔn)確地理解教學(xué)的重點(diǎn)和難點(diǎn)；選準(zhǔn)課堂教學(xué)的切入點(diǎn)。
（2）改進(jìn)課堂結(jié)構(gòu)。根據(jù)教學(xué)的實(shí)際需要和學(xué)生的實(shí)際情況合理地、靈活地安排課堂教學(xué)的環(huán)節(jié)，即對各個(gè)教學(xué)環(huán)節(jié)及其課堂所用時(shí)間進(jìn)行合理的調(diào)整，使課堂結(jié)構(gòu)更合理、更科學(xué)。
（3）創(chuàng)造英語語言環(huán)境。盡量用英語組織課堂教學(xué)，課外開展“英語角”等興趣小組，加強(qiáng)聽、說、讀、寫四種技能的全面訓(xùn)練，讓每一個(gè)學(xué)生都有充分“表現(xiàn)”自己的機(jī)會(huì)，從而增強(qiáng)學(xué)好英語的信心和勇氣。
2.提高教師本身的綜合素養(yǎng)
（1）跨文化交際知識(shí)與文化修養(yǎng)。教英語離不開英語文化。英語教學(xué)的一個(gè)重要目標(biāo)就是培養(yǎng)學(xué)習(xí)者運(yùn)用英語進(jìn)行交際的能力，而培養(yǎng)這種能力，單靠語音、詞匯、語法、句子是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，還要學(xué)習(xí)了解語言形式之外的更豐富的文化內(nèi)容。英語教師不僅應(yīng)該具備跨文化意識(shí)，并且在教學(xué)中時(shí)時(shí)向?qū)W生滲透這種意識(shí)。
（2）人格魅力與師德修養(yǎng)。第一、健康的身心，積極的人生態(tài)度。由于多方面因素，農(nóng)村中學(xué)教師都有各種心理問題，這一方面需要全社會(huì)對教師和教育事業(yè)更多的支持和關(guān)注，另一方面也需要教師學(xué)習(xí)和鍛煉，不斷提高自身的心理素質(zhì)和精神境界。第二、永恒的愛心。關(guān)愛每個(gè)學(xué)生是對教師的起碼要求。教師對學(xué)生應(yīng)有“賞識(shí)教育”和“愛心教育”。第三、開放的心態(tài)與創(chuàng)新的意識(shí)。知識(shí)和信息時(shí)代要求教師不斷更新自己的知識(shí)結(jié)構(gòu)。
總之，在英語教學(xué)中避免兩極分化的這項(xiàng)工作是一項(xiàng)艱巨而長期的系統(tǒng)工程。教師應(yīng)該采取一些行之有效的措施，激發(fā)學(xué)困生的學(xué)習(xí)興趣，增強(qiáng)其學(xué)習(xí)信心，使其成績穩(wěn)步上升，并最終達(dá)到消除兩極分化的目的。
參考文獻(xiàn)
【關(guān)鍵詞】 非小細(xì)胞肺癌
【Abstract】 AIM: To investigate the correlation between the expression of transforming growth factor beta (TGFβ) and the angiogenesis in nonsmall cell lung cancer (NSCLC). METHODS: MVC and expression of TGFβ1 in 50 carcinomatous specimens and expression of TGFβ1 in 35 paracarcinomatous specimens from the same 50 cases with NSCLC were detected by SP immunohistochemistry. RESULTS: Active angiogenesis in NSCLC was detected and it was related with NSCLC progression and lymph node metastasis， but not related with histological types. Significant difference of the expression of TGFβ1 was found between stage Ⅰ and Ⅱ (P
【Keywords】 NSCLC; TGFβ; angiogenesis; immunohistochemistry
【摘要】 目的：研究血管生成與轉(zhuǎn)化生長因子β（TGFβ）在非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）的表達(dá)及其相互關(guān)系. 方法：通過應(yīng)用SP免疫組化方法檢測50例NSCLC組織內(nèi)微血管計(jì)數(shù)（MVC）及50例NSCLC組織和35例癌旁組織中TGFβ1的表達(dá). 結(jié)果：NSCLC癌組織中存在活躍的血管生成，血管生成與病變分期進(jìn)展和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，與組織分型無關(guān). TGFβ1陽性表達(dá)在NSCLC的I期與II期及I期與III期之間有顯著意義（P
【關(guān)鍵詞】 非小細(xì)胞肺癌；轉(zhuǎn)化生長因子β；血管生成；免疫組織化學(xué)
0引言
腫瘤的血管生成（angiogenesis）與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移的全過程密切相關(guān). 肺癌細(xì)胞通過合成、分泌血管生成因子調(diào)節(jié)腫瘤組織的血管生成從而影響肺癌的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移，其中的轉(zhuǎn)化生長因子β(transforming growth factorβ， TGFβ)在原發(fā)性肺癌的表達(dá)、生物學(xué)作用及其與血管生成的關(guān)系為人們所關(guān)注. 為進(jìn)一步了解其在非小細(xì)胞肺癌（nonsmall cell lung cancer， NSCLC）的進(jìn)展和轉(zhuǎn)移中的表達(dá)及與血管生成的關(guān)系，我們采用免疫組化的方法對TGFβ1在非小細(xì)胞肺癌及癌旁組織中的表達(dá)及其與腫瘤血管生成的關(guān)系進(jìn)行了觀察.
1材料和方法
1.1材料
199801/200012經(jīng)手術(shù)切除的NSCLC標(biāo)本50(男35，女15)例， 年齡33～85（平均58士9）歲. 其中35例含癌旁組織. 鱗癌29例，腺癌21例（包括肺泡細(xì)胞癌3例）. TNM I期18例，II期20例，III期12例. 有肺門、縱隔淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移32例，無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移18例. 兔抗人多克隆TGFβ1抗體，濃度1∶60（武漢博士德生物技術(shù)公司）；鼠抗人VIII因子相關(guān)抗原抗體，濃度1∶100（北京中山生物技術(shù)有限公司）；鏈霉菌抗生物素蛋白過氧化酶免疫組化染色超敏試劑盒（福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司）等.
1.2方法
石蠟標(biāo)本切成5 μm厚度切片，脫水、透明、中性樹膠封片. 嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書進(jìn)行SP免疫組化染色. 取已知含有待檢抗原的切片作為陽性對照，用PBS緩沖液代替第一抗體同上方法染色作為陰性對照. TGFβ1表達(dá)以每張切片不少于3個(gè)視野中的細(xì)胞內(nèi)棕黃色顆粒狀染色，且著色明顯高于背景或背景不著色而細(xì)胞著色者為陽性表達(dá). 按染色強(qiáng)度（未著色、弱、中、強(qiáng)）及染色陽性細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)（0%，1%～25%，26%~50%，>50%），分別積分為0，1，2，3，兩項(xiàng)分?jǐn)?shù)之和為0～2分者計(jì)為染色（-），3～6分者計(jì)為染色（＋）. 以癌旁間質(zhì)細(xì)胞中出現(xiàn)同上染色顆粒為癌旁組織陽性表達(dá). 微血管計(jì)數(shù)（microvessel count， MVC）按照Fontanini（J Pathol， 1995;177:57）的方法，用抗FVIIIRA mAB標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞，可見呈棕色或棕黃色染色的血管內(nèi)皮細(xì)胞，先在低倍鏡（4×15）下觀察確定微血管數(shù)量最多的部位，再在高倍鏡（10×15）下，以與周圍細(xì)胞和結(jié)締組織成分明顯區(qū)別的任何一個(gè)棕色染色的內(nèi)皮細(xì)胞、或細(xì)胞叢為一個(gè)血管，只要結(jié)構(gòu)不相連，其分支結(jié)構(gòu)也計(jì)作一個(gè)血管計(jì)數(shù). 腫瘤內(nèi)硬化區(qū)及與腫瘤交界處軟組織內(nèi)的微血管，有厚的平滑肌及管腔直徑大于8個(gè)紅細(xì)胞的血管除外. 在高倍鏡下分別計(jì)數(shù)3個(gè)視野內(nèi)取其平均值即為該例的平均MVC.
統(tǒng)計(jì)學(xué)處理: 數(shù)據(jù)以x±s表示，采用SPSS 11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，多組間均數(shù)比較采用方差分析，兩兩組間比較采用最小顯著差法；兩組間均數(shù)比較采用t檢驗(yàn)，方差不齊時(shí)采用非參數(shù)檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2
檢驗(yàn)；等級(jí)資料采用等級(jí)資料秩和檢驗(yàn).
2結(jié)果
2.1NSCLC組織中的微血管生成NSCLC患者50例的平均MVC為（16.0±4.7）/HP，鱗癌、腺癌的平均MVC值分別為(15.5±4.2)，(17.1±5.7)/HP，二者無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）；癌組織與癌旁組織比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P
2.2TGFβ1在NSCLC組織中的分布在50例NSCLC中30例可檢測到TGFβ1表達(dá)（Fig 2），陽性表達(dá)產(chǎn)物主要分布于癌細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)（Fig 2A，B）；癌旁組織中檢測到的TGFβ1蛋白表達(dá)主要分布于間質(zhì)細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)和極少數(shù)吞噬細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)（Fig 2C，D）. 癌組織TGFβ1陽性率高于癌旁組織（P
3討論
腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移伴隨著新生血管的形成［1］. 腫瘤組織內(nèi)MVC反映了新生血管生成的強(qiáng)度. 本結(jié)果表明NSCLC中存在活躍的血管生成，與癌旁組織比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P
NSCLC細(xì)胞由于其異常的生物代謝，可通過合成、分泌血管生成因子和血管生成抑制因子調(diào)節(jié)腫瘤組織的血管生成［4］. 體外實(shí)驗(yàn)表明TGFβ通過對VEGF的旁分泌調(diào)節(jié)作用促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的長入和毛細(xì)血管腔的形成，因此促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長而發(fā)揮了促腫瘤血管生成作用［5］.
參考文獻(xiàn)
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［3］ Wieser R. The transforming growth factorbeta signaling pathway in tumorigenesis ［J］. Curr Opin Oncol， 2001; 13(1): 70-77.
摘 要： 人的全面發(fā)展與大學(xué)的個(gè)性發(fā)展是相互統(tǒng)一、內(nèi)在一致的。本文主要通過分析大學(xué)生個(gè)性發(fā)展和全面發(fā)展的相互關(guān)系，基于目標(biāo)牽引式學(xué)業(yè)規(guī)劃闡述個(gè)性發(fā)展和全面發(fā)展對大學(xué)生教育培養(yǎng)的重要意義，為大學(xué)生人才培養(yǎng)方案提供一定的發(fā)展方向和參考思路，促進(jìn)當(dāng)代大學(xué)生的全面發(fā)展。
關(guān)鍵詞： 目標(biāo)牽引 學(xué)業(yè)規(guī)劃 培養(yǎng)策略
一、大學(xué)生全面發(fā)展的“人學(xué)”意蘊(yùn)
“人的發(fā)展”這一命題，在人類歷史的長河中，歷代思想家都有過關(guān)注和論述。馬列主義經(jīng)典作家尤其是馬克思、恩格斯，基于對人類社會(huì)發(fā)展規(guī)律的科學(xué)探究，建立了“人學(xué)”，其核心即“人的全面發(fā)展”思想。“人學(xué)”認(rèn)為：人的全面發(fā)展，是人勞動(dòng)、需要、社會(huì)關(guān)系、個(gè)體人能的綜合式的全面發(fā)展，其中，居于關(guān)鍵首位或者充當(dāng)先決基礎(chǔ)條件的是“勞動(dòng)”。勞動(dòng)使人類產(chǎn)生了一定的社會(huì)需要，在滿足社會(huì)需要的過程中，人類不斷形成新的交往形式，產(chǎn)生新的社會(huì)關(guān)系，進(jìn)而推動(dòng)社會(huì)的整體前進(jìn)，在這個(gè)過程中，人的全面發(fā)展的內(nèi)涵得到不斷充實(shí)和豐富。同時(shí)，豐富的社會(huì)關(guān)系使得人們在各方面形成豐富的社會(huì)聯(lián)系，個(gè)人的社會(huì)性日益增強(qiáng)。“人學(xué)”認(rèn)為：“人的全面發(fā)展”的邏輯起點(diǎn)是人在個(gè)體能力維度的全面發(fā)展，是“人的本質(zhì)力量的公開展示”[1]175。人的全面發(fā)展的內(nèi)涵非常廣泛，在性別、年齡、職業(yè)等維度存在一定的差異；個(gè)體在體能、智力、情商等方面的綜合式全面發(fā)展，是個(gè)體能力全面發(fā)展的本質(zhì)內(nèi)涵，同時(shí)也是個(gè)體其他能力全面發(fā)展的充分和必要條件。“人學(xué)”在探討“人的全面發(fā)展”思想命題時(shí)，主要是基于哲學(xué)、政治經(jīng)濟(jì)學(xué)、歷史唯物觀等視角展開的。就高等教育范疇而言，“人的全面發(fā)展”思想作為高等教育的最高價(jià)值目標(biāo)和具體成果體現(xiàn)，最終必須落實(shí)在立德樹人的根本任務(wù)上。因此，在考查大學(xué)生全面發(fā)展的內(nèi)涵時(shí)，我們可以將“人學(xué)”作為目標(biāo)分析的基礎(chǔ)，同時(shí)根據(jù)大學(xué)生的時(shí)代特征和具體特點(diǎn)加以豐富和發(fā)展，形成系統(tǒng)的培養(yǎng)方案。
二、“人學(xué)”視域中的大學(xué)生個(gè)性與全面發(fā)展
大學(xué)時(shí)代是每個(gè)個(gè)體個(gè)性形成和發(fā)展的黃金時(shí)期，伴隨著生理和心理的生長發(fā)育快速成熟，一個(gè)人的社會(huì)關(guān)系、適應(yīng)能力、個(gè)人素質(zhì)都在發(fā)生巨大的轉(zhuǎn)變。從馬克思“人學(xué)”思想來看，個(gè)體素養(yǎng)、個(gè)性特征、社會(huì)適應(yīng)能力三者之間的協(xié)同發(fā)展才是大學(xué)生全面發(fā)展的應(yīng)有題中之義。就大學(xué)生的個(gè)體發(fā)展歷程來看，進(jìn)入大學(xué)讀書的階段，首先是學(xué)習(xí)專業(yè)知識(shí)和技能，并把它作為提高能力、鞏固社會(huì)關(guān)系、提高素質(zhì)、形成個(gè)性的基礎(chǔ)，所以，知識(shí)理論的全面發(fā)展在大學(xué)生全面發(fā)展的體系中有著不可或缺的重要性。換而言之，大學(xué)生要實(shí)現(xiàn)個(gè)體的全面發(fā)展，就必須通過接受高等教育，在理論知識(shí)、實(shí)踐技能、社會(huì)適應(yīng)、個(gè)人素養(yǎng)、個(gè)性特征方面奠定協(xié)同發(fā)展的良好基礎(chǔ)。每個(gè)大學(xué)生都是獨(dú)立發(fā)展的個(gè)體，有著特殊性。大W生的個(gè)性發(fā)展，就是在接受高等教育的過程中發(fā)揮學(xué)習(xí)的主觀能動(dòng)性，結(jié)合自身特點(diǎn)，對學(xué)習(xí)方法和內(nèi)容做出準(zhǔn)確的選擇和科學(xué)的判斷，同時(shí)要注重培養(yǎng)大學(xué)生學(xué)會(huì)思考、注重創(chuàng)新的意識(shí)和勇于進(jìn)取、大膽實(shí)踐的能力。“人學(xué)”思想認(rèn)為：只有“充分發(fā)展個(gè)性，提高人的社會(huì)化程度，才能逐步實(shí)現(xiàn)自己的自覺性、自主性和創(chuàng)造性，在社會(huì)中展示自己，積極發(fā)揮自身的潛能，實(shí)現(xiàn)自己的個(gè)性的全面發(fā)展”[2]359。個(gè)性發(fā)展不僅對個(gè)人而且對整個(gè)社會(huì)都有至關(guān)重要的作用，但個(gè)性發(fā)展必定受到客觀物質(zhì)生活的影響。因此，高等學(xué)校應(yīng)該立足立德樹人的根本任務(wù)，發(fā)揮在社會(huì)主義建設(shè)者和接班人培養(yǎng)中的功能定位，科學(xué)界定大學(xué)生個(gè)性培養(yǎng)的目標(biāo)，合理激發(fā)大學(xué)生個(gè)人素養(yǎng)提升的因子，促進(jìn)大學(xué)生全面發(fā)展。
三、基于目標(biāo)牽引式學(xué)業(yè)規(guī)劃的大學(xué)生全面發(fā)展及培養(yǎng)策略
大學(xué)時(shí)代正是大學(xué)生個(gè)性發(fā)展最關(guān)鍵的時(shí)期，每一個(gè)大學(xué)生都有著獨(dú)特的個(gè)性與追求。因此，在堅(jiān)持學(xué)生的主體性與教育教學(xué)、人才培養(yǎng)的主導(dǎo)性相統(tǒng)一的同時(shí)，高等學(xué)校應(yīng)當(dāng)注重挖掘?qū)W生個(gè)性發(fā)展的潛能，提升學(xué)生個(gè)性發(fā)展的水平，最終幫助大學(xué)生實(shí)現(xiàn)全面發(fā)展。基于此，我們提出了大學(xué)生個(gè)性與全面發(fā)展相結(jié)合的策略構(gòu)想――目標(biāo)牽引式學(xué)業(yè)規(guī)劃。
所謂“目標(biāo)牽引式學(xué)業(yè)規(guī)劃”，是指高等學(xué)校以“人學(xué)”思想為指導(dǎo)，綜合考量、評(píng)估學(xué)生不同個(gè)體的興趣愛好、人格特質(zhì)等自然屬性，分層次、分眾化開展專業(yè)認(rèn)知教育、職業(yè)生涯規(guī)劃指導(dǎo)，提供可實(shí)現(xiàn)目標(biāo)的素質(zhì)拓展活動(dòng)群和專業(yè)教育課程群，并幫助學(xué)生明確大學(xué)期間的階段性目標(biāo)、規(guī)劃人生發(fā)展方向，在學(xué)生個(gè)體發(fā)展的同時(shí)實(shí)現(xiàn)全面發(fā)展的協(xié)同。“目標(biāo)牽引式學(xué)業(yè)規(guī)劃”方案的制訂，在頂層設(shè)計(jì)上必須堅(jiān)持以“人學(xué)”思想為中心，以人才培養(yǎng)目標(biāo)為遵循，以大學(xué)生個(gè)體素養(yǎng)拓展、職業(yè)生涯規(guī)劃為主線，尊重高等教育普遍規(guī)律和大學(xué)生身心發(fā)展現(xiàn)狀，盤活學(xué)校育人資源，協(xié)同育人工作機(jī)制，突出學(xué)生在人才培養(yǎng)過程中的主體間性[3]41。要把“目標(biāo)牽引式學(xué)業(yè)規(guī)劃方案”貫穿學(xué)生學(xué)習(xí)的整個(gè)過程，以學(xué)生的發(fā)展作為目標(biāo)，將素質(zhì)拓展與專業(yè)學(xué)習(xí)有機(jī)結(jié)合起來，培養(yǎng)過程以學(xué)期（或?qū)W年）為時(shí)間單位分階段實(shí)施，深化教育教學(xué)改革，為社會(huì)培養(yǎng)高素質(zhì)人才，可以從以下幾個(gè)方面著手：
（一）助力大學(xué)新生開展自我認(rèn)知，進(jìn)行生涯定位。
大學(xué)新生在入校之后，入學(xué)教育往往配合軍訓(xùn)展開，學(xué)生此時(shí)通常對大學(xué)生活充滿新鮮感及對未來的生活工作產(chǎn)生迷茫。這時(shí)，各高校應(yīng)借助專業(yè)測評(píng)工具或和職業(yè)生涯規(guī)劃理論，為高校新生進(jìn)行形式具體的新生職業(yè)能力傾向測試的性格測驗(yàn)等，使得新生能夠順利進(jìn)行自我認(rèn)知，從而制訂正確的學(xué)業(yè)或職業(yè)的規(guī)劃，度過充實(shí)的大學(xué)生活。在進(jìn)行過一定的自我認(rèn)知之后，高校新生對大學(xué)和自我的環(huán)境已經(jīng)有了一定的定位，此時(shí)，各班級(jí)輔導(dǎo)員或者具體負(fù)責(zé)老師應(yīng)當(dāng)根據(jù)每一位學(xué)生的特點(diǎn)，幫助他們明確個(gè)人發(fā)展方向和目標(biāo)，組織學(xué)生通過軟件測評(píng)，對學(xué)生進(jìn)行職業(yè)生涯規(guī)劃教育，并結(jié)合各專業(yè)的特殊情況，開展職業(yè)生涯規(guī)劃與就業(yè)創(chuàng)業(yè)課，對大一新生進(jìn)行系統(tǒng)的指導(dǎo)，幫助他們正確進(jìn)行生涯定位。
（二）努力提升老生綜合素質(zhì)，制訂生涯規(guī)劃。
步入大二，學(xué)生對大學(xué)生活已經(jīng)有了自我了解，對自身也已經(jīng)有了一定的定位，此時(shí)，高等學(xué)校應(yīng)根據(jù)學(xué)生對學(xué)業(yè)（職業(yè)）規(guī)劃的不同需求，幫助其制訂合理的實(shí)施計(jì)劃。實(shí)施計(jì)劃包括課堂學(xué)習(xí)、課外實(shí)踐兩個(gè)主要組成部分，便于學(xué)生在不同時(shí)間節(jié)點(diǎn)自主選擇具體的課堂學(xué)習(xí)或課外實(shí)踐工作任務(wù)（或工作項(xiàng)目），相應(yīng)專業(yè)課老師、輔導(dǎo)員在此過程中進(jìn)行一對一的跟蹤指導(dǎo)。另外，在開展這一工作前，由學(xué)校提供統(tǒng)一模板參考實(shí)施。
（三）組織學(xué)生進(jìn)行自我評(píng)估，修正階段性目標(biāo)。
每學(xué)年，學(xué)校組織學(xué)生對照個(gè)人階段目標(biāo)完成情況進(jìn)行自我評(píng)估，并將此項(xiàng)工作納入學(xué)生學(xué)年考核工作，檢查任務(wù)完成情況，及時(shí)總結(jié)經(jīng)驗(yàn)。針對一些未能完成計(jì)劃的情況，組織學(xué)生全面分析，查找并指出不足，及時(shí)提出目標(biāo)修正措施或整改意見，使得學(xué)生的規(guī)劃更能適應(yīng)學(xué)校的成才環(huán)境，更符合實(shí)際情況，更有利于個(gè)人成才。
（四）系統(tǒng)謀劃統(tǒng)籌推進(jìn)，保障目標(biāo)牽引取得實(shí)效。
目標(biāo)牽引式學(xué)業(yè)規(guī)劃方案是一項(xiàng)系統(tǒng)工程，這就要求高校各部門之間分工協(xié)作，積極配合，整體推進(jìn)，明確各部門的職能，合理規(guī)劃，積極調(diào)動(dòng)學(xué)生參與的積極性和主動(dòng)性。伴隨著“目標(biāo)牽引式學(xué)業(yè)規(guī)劃方案”的實(shí)施，學(xué)校應(yīng)成立工作領(lǐng)導(dǎo)小組，具體幫助學(xué)生，如學(xué)生處，這是與學(xué)生最密切的一個(gè)部分，輔導(dǎo)員和班主任是與學(xué)生接觸最多的，應(yīng)當(dāng)對他們進(jìn)行一定的職業(yè)生涯規(guī)劃理論培訓(xùn)，使他們在與學(xué)生的日常相處與交流中潛移默化，幫助學(xué)生樹立正確的世界觀、人生觀，并通過一系列的班級(jí)活動(dòng)帶領(lǐng)學(xué)生進(jìn)行正確的職業(yè)生涯規(guī)劃和就業(yè)指導(dǎo)。學(xué)校各二級(jí)院系團(tuán)委也應(yīng)通過一系列活動(dòng)，完善并豐富大學(xué)生的課外素質(zhì)拓展體系，豐富學(xué)生的第二課堂，寓教于樂，滿足廣大學(xué)生的成才需求。除此之外，教務(wù)處、各二級(jí)院系、圖書館也應(yīng)建立健全相應(yīng)措施，幫助學(xué)生全面發(fā)展。
參考文獻(xiàn)：
[1]馬克思恩格斯選集（第1卷）[M].北京：人民出版社，1972.
【關(guān)鍵詞】 銀屑病 Toll樣受體2 抗鏈球菌溶血素 白細(xì)胞介素8
［ABSTRACT］ObjectiveTo investigate the expression of tolllike receptor 2 (TLR2) mRNA in monocytes of psoriatic patients’ blood and the serum levels of interleukin8 (IL8) and antistreptolysin O (ASO)， and to explore their relevance to pathogenesis of psoriasis.MethodsExpression of TLR2 mRNA were detected by reverse transcription polymerase chain reaction (RTPCR) method; serum levels of ASO and IL8 were detected by latex agglutination assay and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) respectively. ResultsExpression of TLR2 mRNA of the patients was higher than that of the controls (t=5.541，P＜0.01). There was no significant difference in the expression of TLR2 mRNA between guttate and plaque psoriatic patients (t=0.318，P＞0.05). The positive rate of ASO in the patients was higher than that of the controls (χ2=8.604，P＜0.01); and the ASO positive rate in guttate patients was higher than that in plaque psoriatic patients (χ2=9.780，P＜0.01). Level of IL8 in psoriatic patients was higher than that controls (t=28.463，P＜0.01); there was no significant difference between guttate and plaque psoriatic patients (t=0.660，P＞0.05). The expression of TLR2 mRNA in psoriatic patients with positive ASO was higher than that in patients with negetive ASO (t=2.407，P＜0.05); the expressions of TLR2 mRNA and IL8 in psoriatic patients had a positive correlation (r=0.637， P＜0.01). ConclusionTLR2 may be involved in the occurence and development of psoriasis by recognizing the invading streptosis and the following generation of cytokines.
［KEY WORDS］psoriasis; tolllike receptor 2; antistreptolysin; interleukin8
銀屑病是一種常見的慢性炎癥性皮膚病，與遺傳和環(huán)境因素有關(guān)，其病因和發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，目前多認(rèn)為是一種T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫失衡性疾病。有研究表明，細(xì)菌、真菌、病毒等微生物感染與銀屑病的發(fā)生和發(fā)展有密切關(guān)系，并認(rèn)為銀屑病是一種皮膚抵抗病原微生物的防御性表現(xiàn)［1］。近年來，Toll樣受體(TLR)在感染性疾病及銀屑病中的作用引起國內(nèi)外有關(guān)專家的廣泛關(guān)注［2，3］；已有研究表明，IL8可促進(jìn)銀屑病的炎癥浸潤，介導(dǎo)皮損的發(fā)生和發(fā)展［4］。銀屑病病人TLR2基因表達(dá)國外多集中于對角質(zhì)形成細(xì)胞（KC）的研究，尚未見銀屑病病人外周血單個(gè)核細(xì)胞TLR2基因表達(dá)，以及關(guān)于感染與TLR2基因表達(dá)及IL8水平關(guān)系的相關(guān)報(bào)道。本文采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RTPCR）方法檢測銀屑病病人外周血單個(gè)核細(xì)胞TLR2基因表達(dá)水平，并分別采用膠乳凝集法和酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測血清抗鏈球菌溶血素“O”（ASO）和白細(xì)胞介素8（IL8）水平，探討其與銀屑病發(fā)病的關(guān)系，從而為闡明感染誘發(fā)或加重銀屑病提供分子水平的證據(jù)。
1 資料和方法
1.1 一般資料
銀屑病病人（銀屑病組）均為我院門診皮膚科病人，具有典型皮損，臨床診斷明確。其中，點(diǎn)滴型銀屑病病人30例，男16例，女14例；年齡17～60歲，平均33.13歲；病程1周～1.5月；發(fā)病前1周～1月有發(fā)熱、咽喉腫痛或其他上呼吸道感染癥狀。斑塊型銀屑病病人20例，男9例，女11例；年齡18～63歲，平均34.5歲；病程3月～10年；所有病人觀察前1月未接受系統(tǒng)治療，且不伴有其他急慢性疾病。對照組30例，為來我院體檢的健康人，男女各15例；年齡19～64歲，平均36.24歲；近1月內(nèi)均無發(fā)熱、咽喉腫痛等明顯上呼吸道感染癥狀，且不伴有其他急慢性疾病。
1.2 標(biāo)本收集
常規(guī)消毒皮膚后，抽取外周靜脈血5 mL，其中2 mL枸櫞酸鈉抗凝，用于TLR2 mRNA的檢測；其余3 mL置試管中，待血塊收縮后以2 500 r/min離心分離血清，分裝后置-20 ℃冰箱保存，分別用于ASO、IL8水平檢測。
1.3 TLR2 mRNA表達(dá)檢測
以小量血液總RNA抽提試劑盒（上海華舜生物工程有限公司）提取外周血中總RNA，紫外分光光度計(jì)（DU640，美國Beckman公司）測定其純度和含量，取RNA樣本2 μg采用一步法RTPCR檢測TLR2 mRNA表達(dá)，以β肌動(dòng)蛋白（βactin）為內(nèi)參照。引物（上海生工生物工程技術(shù)服務(wù)公司合成）序列為：TLR2正義：3′GCCAAAGTCTTGATTGATTGG5′，反義：3′TTGAAGTTCTCCAGCTCCTG5′，產(chǎn)物長度為347 bp；βactin正義：3′ACGTCTGCTGGAAGGTGGAC5′，反義：3′GGTACCACCATGTACCCAGG5′，產(chǎn)物長度為168 bp。
1.4 擴(kuò)增產(chǎn)物檢測
PCR擴(kuò)增完畢后，每個(gè)反應(yīng)體系取產(chǎn)物2 μL，于20 g/L瓊脂糖凝膠中進(jìn)行電泳，在紫外線透射凝膠成像儀（VilberLourmat，F(xiàn)rance）中分析電泳帶的灰度值，以TLR2/βactin記錄結(jié)果，作為TLR2 mRNA的相對表達(dá)水平。
1.5 ASO檢測
采用膠乳凝集法（試劑為北京利德曼生化有限公司生產(chǎn)的ASO膠乳試劑），以ASO＞2×105 kU/L為陽性。
1.6 血清IL8水平測定
采用雙抗體夾心ELISA法（試劑盒為Biosource ELISA kit，北京中昊時(shí)代生物技術(shù)分裝）。具體操作嚴(yán)格按試劑盒說明書進(jìn)行，即刻測量標(biāo)本在492 nm波長處吸光度值，并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線查出其濃度。
2 結(jié)
果
銀屑病組TLR2 mRNA的表達(dá)水平顯著高于正常對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t＝5.541，P＜0.01）；點(diǎn)滴型組與斑塊型組比較差異無顯著性（t＝0.318，P＞0.05）。銀屑病組ASO陽性率明顯高于正常對照組，差異有顯著性（χ2=8.604，P＜0.01）；點(diǎn)滴型組明顯高于斑塊型組，差異亦有顯著性（χ2=9.780，P＜0.01）。銀屑病組IL8水平顯著高于正常對照組，差異有顯著性（t＝28.463，P＜0.01）；點(diǎn)滴型組與斑塊型組相比差異無顯著意義（t＝0.660，P＞0.05）。點(diǎn)滴型銀屑病病人ASO陽性者TLR2 mRNA表達(dá)水平（1.020±0.152）明顯高于ASO陰性者（0.871±0.186），差異有顯著意義（t＝2.407，P＜0.05）；銀屑病病人外周血單個(gè)核細(xì)胞TLR2 mRNA表達(dá)與血清IL8水平呈正相關(guān)（r=0.637，P＜0.01）。見表1。表1 各組TLR2 mRNA表達(dá)及ASO、IL8檢測結(jié)果比較
3 討
論
3.1 TLR2與銀屑病的關(guān)系
TLR是一新的蛋白家族，是機(jī)體通過感知病原微生物直接做出防御反應(yīng)的天然免疫受體，可啟動(dòng)天然免疫反應(yīng)和影響后繼的獲得性免疫反應(yīng)［2］，成為天然免疫和獲得性免疫之間的橋梁。TLR中與銀屑病關(guān)系密切的主要是TLR2。以往對TLR2與銀屑病關(guān)系的研究，主要來自對皮膚KC的觀察。
BAKER等［3］采用免疫染色法研究顯示，TLR2在正常皮膚表皮基底細(xì)胞高度表達(dá)，而在銀屑病病人皮損處表皮基底細(xì)胞中度表達(dá)，在表皮上部KC高度表達(dá)。已有研究表明，銀屑病皮損中細(xì)菌、真菌等的定植明顯高于正常皮膚，因此，TLR2在表皮上層表達(dá)上調(diào)可能是角蛋白對病原微生物存在的反應(yīng)。
已有研究表明，銀屑病病人皮損中存在TLR2基因表達(dá)上調(diào)，但尚未見血液中單個(gè)核細(xì)胞TLR2基因表達(dá)與銀屑病關(guān)系的相關(guān)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)采用高敏感性的RTPCR方法對銀屑病病人外周血單個(gè)核細(xì)胞TLR2 mRNA表達(dá)進(jìn)行研究，結(jié)果顯示，銀屑病組TLR2 mRNA表達(dá)顯著高于正常對照組，差異有顯著性，提示銀屑病的發(fā)生、發(fā)展過程中也存在外周血單個(gè)核細(xì)胞TLR2基因表達(dá)上調(diào)。
3.2 鏈球菌感染與銀屑病的關(guān)系
鏈球菌感染人體后，體內(nèi)可產(chǎn)生抗ASO抗體。本研究結(jié)果顯示，銀屑病組ASO陽性率明顯高于正常對照組，差異有顯著性，提示尋常型銀屑病的發(fā)生或發(fā)展與鏈球菌感染有關(guān)；點(diǎn)滴型病人ASO陽性率亦高于斑塊型病人，兩組之間有顯著性差異；點(diǎn)滴型病人ASO陽性者TLR2 mRNA表達(dá)水平高于ASO陰性者，提示鏈球菌感染可能通過誘導(dǎo)TLR2基因表達(dá)上調(diào)，活化TLR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，從而介導(dǎo)銀屑病皮損的發(fā)生。
點(diǎn)滴型銀屑病病人發(fā)病前均有不同程度的上呼吸道感染癥狀，提示可能存在鏈球菌感染；而斑塊型銀屑病病人無明顯上呼吸道感染史，而統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示兩組間TLR2 mRNA表達(dá)無顯著性差異［5］。據(jù)此我們推測鏈球菌感染可能在點(diǎn)滴型銀屑病的發(fā)病過程中起重要作用，而斑塊型銀屑病可能與其他真菌、細(xì)菌、病毒感染的關(guān)系更為密切，如馬拉色菌及金黃色葡萄球菌、HIV等［6，7］，但確切原因還有待于進(jìn)一步研究。
3.3 IL8與銀屑病的關(guān)系
IL8是一種重要的多元性炎癥細(xì)胞趨化因子，主要來源于活化的單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、部分CD+4T淋巴細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、KC等多種細(xì)胞。有研究顯示，銀屑病病人皮損處KC表達(dá)IL8及其受體明顯高于正常對照組，并認(rèn)為這可能與銀屑病病人皮損局部表現(xiàn)出的KC高度增殖有關(guān)［4］；也有文獻(xiàn)認(rèn)為，血清中IL8水平明顯升高［8］。本文結(jié)果顯示，銀屑病病人血清IL8水平明顯高于正常對照組，差異有顯著性，這與以往研究結(jié)果一致；銀屑病病人外周血單個(gè)核細(xì)胞TLR2基因表達(dá)與血清IL8水平呈正相關(guān)，提示TLR2可能介導(dǎo)了病原微生物誘導(dǎo)的細(xì)胞因子IL8分泌，繼而IL8通過趨化炎癥細(xì)胞至皮損局部和促使KC高度增殖而表現(xiàn)出銀屑病特有的臨床及病理癥狀。
綜上所述，TLR2可能通過識(shí)別病原微生物感染參與銀屑病皮損的發(fā)生，而IL8可能是參與銀屑病皮損形成的重要細(xì)胞因子。病原微生物可引起外周血單個(gè)核細(xì)胞TLR2基因表達(dá)上調(diào)，啟動(dòng)天然免疫應(yīng)答，進(jìn)而影響后繼的獲得性免疫應(yīng)答，參與銀屑病免疫、炎癥反應(yīng)，最終可能導(dǎo)致銀屑病皮損的發(fā)生和發(fā)展。對TLR2的進(jìn)一步研究，將有助于闡明銀屑病的病因和發(fā)病機(jī)制，從而為臨床提供更加積極有效的預(yù)防及治療措施，并將為抗TLR2單克隆抗體的制備及應(yīng)用提供可能的理論依據(jù)。但有關(guān)感染與銀屑病的關(guān)系及TLR在銀屑病發(fā)病中的作用還有待于進(jìn)一步研究。
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【關(guān)鍵詞】 顱腦損傷/分型;急性期;血炎性細(xì)胞因子/外周血
腦外傷患者急性期常伴有外周血炎性細(xì)胞因子表達(dá)變化[1-2],不同分型腦外傷患者上述指標(biāo)表達(dá)也有明顯差異。筆者檢測了89例不同分型腦外傷患者急性期外周各血炎性細(xì)胞因子,現(xiàn)報(bào)告如下。
1 資料和方法
1.1 一般資料 選擇2007年1月至2009年5月在盤錦市第二人民醫(yī)院神經(jīng)外科住院治療的腦外傷患者,納入標(biāo)準(zhǔn):①發(fā)病后6 h內(nèi)來本院首診。②年齡≥18歲。排除標(biāo)準(zhǔn):①合并有其他嚴(yán)重軀體性疾病患者。②腦卒中史及再發(fā)腦外傷患者。③腦外傷后有嚴(yán)重的視覺和聽覺障礙表現(xiàn)。④有精神疾病或精神疾病家族史。⑤初中以下文化程度。腦外傷患者入選89例,男53例,女36例,年齡22～75,平均(45.80±7.44)歲。全部入選對象根據(jù)入院時(shí)GCS評(píng)分分為2組:輕型顱腦損傷組(GCS評(píng)分13~15分,55例),中、重型顱腦損傷組(GCS評(píng)分≤12分,34例)。
1.2 方法
1.2.1 格拉斯哥昏迷評(píng)分及血清炎性因子測定方法 ①格拉斯哥昏迷評(píng)分(GCS)包括運(yùn)動(dòng)、語言和睜眼3大部分指標(biāo),將3部分得分相加,即得到GCS評(píng)分,得分越低代表病情越重,評(píng)分時(shí)間在入院后6 h內(nèi)進(jìn)行。②血清炎性因子測定 入選患者均于入院1 d和7 d清晨空腹抽靜脈血6 ml,立即離心分離上清液,置-70℃冰箱保存,成批量統(tǒng)一檢測血清、TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8含量。測定血清IL-1、IL-6和IL-8含量采用ELISA法,試劑盒由深圳晶美生物工程有限公司提供;測定TNF-α用放射免疫法,試劑盒由北京東亞生物技術(shù)研究所提供。
1.2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 10.0分析軟件對收集到的數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,觀察和統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,用t檢驗(yàn)進(jìn)行組間顯著性分析。
2 結(jié)果
不同分型腦外傷患者急性期外周血清炎性細(xì)胞因子變化比較見表1。
表1
不同分型腦外傷患者急性期外周血清炎性細(xì)胞因子變化比較(μg/L,x±s)
分組TNF-αIL-1
第1天第7天第1天第7天
輕型腦外傷組(n=55)1.06±0.09a1.03±0.10b0.17±0.02a0.26±0.04b
中、重型腦外傷組(n=34)1.15±0.121.31±0.170.24±0.030.38±0.06
作者單位:124000盤錦市第二人民醫(yī)院神經(jīng)外科
分組IL-6
IL-8
第1天第7天第1天第7天
輕型腦外傷組(n=55)0.10±0.02a0.29±0.04a0.12±0.03b0.31±0.04b
中、重型腦外傷組(n=34)0.14±0.030.31±0.070.18±0.050.49±0.06
注:與中、重型腦外傷組比較:aP
3 討論
隨著汽車交通時(shí)代的提前到來和交通事故急劇增多,顱腦外傷也成了日常生活中的常見病和多發(fā)病。炎性反應(yīng)是該病患者重要的病理生理過程,腦組織損傷后也有類似外周器官的免疫激活,釋放大量免疫調(diào)節(jié)物質(zhì),導(dǎo)致了創(chuàng)傷后粘附分子表達(dá)、細(xì)胞滲透、炎性表現(xiàn)均顯著增強(qiáng)。一般認(rèn)為[1-2],急性顱腦損傷后外周血清炎性細(xì)胞因子變化主要來自于腫瘤壞死因子(TNF-α)和白細(xì)胞介素(IL)-1、6和8的大量增加,促進(jìn)炎性細(xì)胞的聚集和激活,增強(qiáng)嗜中性粒細(xì)胞及單核細(xì)胞的粘附作用,導(dǎo)致腦血管結(jié)構(gòu)和血腦屏障的破壞,從而進(jìn)一步加劇了顱腦損害。本研究以血清TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8為測試指標(biāo),選擇了89例腦外傷患者為觀察對象,并根據(jù)急性期格拉斯哥昏迷評(píng)分分組,觀察不同病情腦外傷患者住院后第1天和第7天外周各血炎性細(xì)胞因子表達(dá),結(jié)果表明中、重型腦外傷組第1天和第7天血清TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8濃度均明顯高于輕型顱腦損傷患者。一些文獻(xiàn)[3-4]解釋這些表現(xiàn)常與腦外傷后腦組織水腫高峰期一致,傷后1周內(nèi)血清TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8高水平表達(dá)提示腦損傷程度嚴(yán)重和預(yù)后差,而上述指標(biāo)持續(xù)不降則說明繼發(fā)性腦損傷改變加劇,這些現(xiàn)象提示炎性細(xì)胞因子在腦外傷后繼發(fā)性腦損害經(jīng)過中扮演重要角色。
鑒于不同分型腦外傷患者急性期常出現(xiàn)不同程外周血炎性細(xì)胞因子表達(dá),后者還常被作為判斷腦損傷程度和預(yù)后的重要參考指標(biāo),同時(shí)抑制或減少顱腦損傷后炎性細(xì)胞因子的含量,還可作為治療中、重型顱腦損傷患者的可靠方法。因此監(jiān)測顱腦損傷后患者血清中TNF-α、IL-1、IL-6和IL-8濃度指標(biāo)較為重要,對于臨床診斷、預(yù)后判斷以及指導(dǎo)顱腦損傷各時(shí)相遏制炎性反應(yīng)干預(yù)治療,提高顱腦損傷救治水平都具有十分重要的意義。
參 考 文 獻(xiàn)
[1] 高玉松,袁紹紀(jì),劉正義,等.顱腦損傷程度與血清中IL-6、TNF-α含量水平的關(guān)系.中國實(shí)用醫(yī)藥,2006,1(1):18-20.
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關(guān)鍵詞：多目標(biāo)地球化學(xué)；SPSS；因子分析；地球化學(xué)分區(qū)；龍門縣
中圖分類號(hào)：P591 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1009-2374（2011）33-0071-03
多目標(biāo)地球化學(xué)調(diào)查是針對第四紀(jì)覆蓋區(qū)開展的基礎(chǔ)性調(diào)查工作，主要包括基礎(chǔ)地質(zhì)、資源潛力與生態(tài)環(huán)境等三大方面。測試結(jié)果包括54項(xiàng)元素的地球化學(xué)特征，具有信息量大，數(shù)據(jù)多的特點(diǎn)。如何處理大量數(shù)據(jù)，獲取不同區(qū)域地球化學(xué)特征是一項(xiàng)艱巨的任務(wù)。本文以廣東省惠州市龍門縣多目標(biāo)地球化學(xué)調(diào)查成果為例，介紹了基于SPSS統(tǒng)計(jì)軟件的因子分析在地球化學(xué)分區(qū)中的應(yīng)用。
一、多目標(biāo)地球化學(xué)分區(qū)依據(jù)
1．地球化學(xué)分區(qū)依據(jù)在于：一是要基于介質(zhì)的地球化學(xué)性質(zhì)，二是要能夠反映表殼巖系的主要差異，三是要具備區(qū)域性的、連續(xù)性的分區(qū)特征。
2．地球化學(xué)分區(qū)應(yīng)為環(huán)境、農(nóng)業(yè)和資源等應(yīng)用領(lǐng)域提供基礎(chǔ)地球化學(xué)依據(jù)。
3．陸域表層和深層土壤地球化學(xué)特征顯著，都對地質(zhì)背景的地球化學(xué)性質(zhì)繼承明顯，但表層土壤的樣品密度是深層的4倍，因此，采用表層土壤（原始數(shù)據(jù)）進(jìn)行地球化學(xué)分區(qū)。
4．鑒于表層土壤經(jīng)受了一定程度的生物作用和人為輸入作用，雖然作用不顯著，基本沒有掩蓋土壤的自然演變規(guī)律，但在利用元素地球化學(xué)數(shù)據(jù)進(jìn)行分區(qū)時(shí)，不考慮TC、Corg、N、S、Br、Cl、Hg、Cd、I、B等10項(xiàng)指標(biāo)（進(jìn)行各分區(qū)統(tǒng)計(jì)量計(jì)算時(shí)，仍計(jì)算這些元素和指標(biāo)）。
5．利用多目標(biāo)地球化學(xué)調(diào)查其余的44項(xiàng)元素地球化學(xué)指標(biāo)采用數(shù)學(xué)方法進(jìn)行分區(qū)計(jì)算，盡量不進(jìn)行人為干擾。
二、多目標(biāo)地球化學(xué)分區(qū)方法
1．用因子分析的方法進(jìn)行變量降維和指標(biāo)組合，從指標(biāo)組合特征尋求分區(qū)信息。
2．進(jìn)行樣品聚類分析和判別分析，對樣品進(jìn)行空間分類。
3．根據(jù)以上計(jì)算結(jié)果，結(jié)合其最擬合的背景因素（地質(zhì)背景、土壤類型等）進(jìn)行分區(qū)和綜合。
4．進(jìn)行各區(qū)命名、地球化學(xué)特征歸納及不同應(yīng)用領(lǐng)域的適宜性討論。
三、多目標(biāo)地球化學(xué)分區(qū)過程
1．利用表層土壤44項(xiàng)元素和指標(biāo)進(jìn)行因子分析，按特征值大于1的限定共提取9個(gè)因子。其中，因子F1的元素組合為Th、U、Rb、Ga、Al2O3、Ti、Be、Tl、Cr、Nb、SiO2、Ce、Y、Ge、F、Sn、Na2O，方差解釋量達(dá)32%。由樣品因子得分圖（圖1）可知樣品得分值分為三部分，高值區(qū)（約大于0.27）與龍門縣西部早白堊世花崗巖分布區(qū)相吻合，低值區(qū)（約小于-0.28）與龍門縣第四系、泥盆紀(jì)及石炭紀(jì)等的沉積巖相吻合，中值區(qū)（0.27～-0.28）與其他古生界地層、中生代火山巖、花崗巖、堿入巖和變質(zhì)巖等相吻合。可見，因子分析結(jié)果反映了龍門縣的元素地球化學(xué)分布總體特征，為地球化學(xué)分區(qū)提供了基礎(chǔ)框架。
2．以上計(jì)算表明，龍門縣表層土壤對地質(zhì)背景的反映靈敏，根據(jù)表層土壤地球化學(xué)特征進(jìn)行地球化學(xué)分區(qū)切實(shí)可行。據(jù)此，進(jìn)行三個(gè)地球化學(xué)區(qū)劃分，即“地派－南昆山地球化學(xué)區(qū)”――為龍門西部火山巖分布區(qū)，“藍(lán)田－左潭－路溪地球化學(xué)區(qū)”――即古生界地層、中生代火山巖、花崗巖、堿入巖和變質(zhì)巖地區(qū)化學(xué)區(qū)，“平陵－龍華－麻榨地球化學(xué)區(qū)”――即龍門東南部至西南部第四系、泥盆紀(jì)及石炭紀(jì)等的沉積巖分布區(qū)。各地球化學(xué)區(qū)主要以地質(zhì)界線劃分，同時(shí)省去各區(qū)內(nèi)其他零星的地質(zhì)背景區(qū)（圖1，圖2）。
四、地球化學(xué)分區(qū)結(jié)論
表層土壤中54項(xiàng)元素和指標(biāo)在不同地球化學(xué)區(qū)和亞區(qū)中的原始含量水平及分布特征各有不同，結(jié)合地形地貌等因素，不同地球化學(xué)區(qū)和亞區(qū)的農(nóng)業(yè)、環(huán)境和資源的適宜性也各不相同。
（一）地派D南昆山地球化學(xué)區(qū)
1．該區(qū)S、Cl、Fe2O3、Zn、I、Mo、Se、F、Br、La、Ge、Sn、Ga、Tl、Be、Th、U、Ce、Zr、Y、Nb、Rb、Al2O3、W含量為全區(qū)最高，CaO、P、MgO、SiO2、Co、V、Pb、Sr、Ba、Ti、Sc含量為全區(qū)最低。
2．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方面，本區(qū)為中低山和丘陵地貌，地形起伏大，不利于連片種植和灌溉，因此農(nóng)業(yè)生產(chǎn)條件較差，可發(fā)展林地和園地等管理粗放型農(nóng)業(yè)，土壤主要為花崗巖風(fēng)化土，土壤較其他地球化學(xué)區(qū)作物營養(yǎng)元素N、P、S、Corg和有益元素Mn、Br、I等含量均較少，因此，土壤肥力不好，應(yīng)廣施復(fù)合肥等。值得注意的是該地區(qū)富含Se元素，應(yīng)進(jìn)一步追蹤Se元素的分布特征，發(fā)展富硒特色農(nóng)作物的種植。
3．在環(huán)境方面，重金屬元素除了Zn以外含量均少，潛在放射性元素U、Th含量較高，標(biāo)準(zhǔn)差又很大，因此局部地區(qū)存在放射性污染環(huán)境質(zhì)量安全威脅。
4．在資源方面，稀土元素La、Ce及Zn、W、Sn、Mo等元素含量最高，元素組合特征明顯，因此，形成火山巖型及其次生作用類型的貴金屬或有色金屬礦產(chǎn)可能性大。其次，Al2O3的含量為各地球化學(xué)區(qū)最高，標(biāo)準(zhǔn)差也最大，加上土壤在熱帶條件下強(qiáng)烈而又持久的脫硅富鋁作用，有可能在局部形成鋁土礦床。
（二）藍(lán)田－左潭－路溪地球化學(xué)區(qū)
1．該區(qū)K2O、Na2O、MgO、Mn、Co、Bi、Sr、Ba、Sc的含量為全區(qū)最高，TC、Corg、N、S 、Fe2O3、Cu、Se、Cr、Ni、Cd、Sb、Hg、As、Li、Zr、Ag、Au、B的含量為全區(qū)最低（表1）。
2．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方面，本區(qū)為山地地貌，主要為花崗巖風(fēng)化土，土壤粘度極低，透水性好，不易保水保肥，因此農(nóng)業(yè)生產(chǎn)條件較差；土壤中作物營養(yǎng)元素、有益元素等含量最低，土壤肥力差，應(yīng)廣施各類肥料，確保農(nóng)業(yè)豐收；上述元素的含量分布標(biāo)準(zhǔn)差大小不一，這就意味著元素含量空間分布的均勻性不確定，可能存在局部富集地區(qū)，因此要加強(qiáng)土地特別是農(nóng)業(yè)用地利用規(guī)劃，為農(nóng)業(yè)高產(chǎn)高效和安全生產(chǎn)提供科學(xué)決策。
3．在環(huán)境方面，重金屬元素及放射性元素含量少，因此在該區(qū)應(yīng)大力發(fā)展綠色無公害農(nóng)產(chǎn)品。
4．在資源方面，Mn元素含量最高，元素組合特征不明顯，因此，形成火山巖型及其次生作用類型的貴金屬或有色金屬礦產(chǎn)可能性不大。
（三）平陵－龍華－麻榨地球化學(xué)區(qū)
1．該區(qū)TC、Corg、N、CaO、P、SiO2、Cu、Cr、V、Ni、Cd、Sb、Hg、Pb、As、Li、Ti、Ag、Au、B的含量為全區(qū)最高，K2O、Cl、Na2O、Zn、Mn、I、Mo、F、Br、La、Ge、Sn、Ga、Bi、Tl、Be、Th、U、Ce、Y、Nb、Rb 、Al2O3、W的含量為全區(qū)最低（表1）。
2．在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方面，本區(qū)為臺(tái)地地貌類型，地形起伏不明顯，水資源較豐富，土壤高粘性，透水性差，易于蓄積水源用于灌溉，因此農(nóng)業(yè)生產(chǎn)條件較好，農(nóng)業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)；土壤較其他地球化學(xué)區(qū)具最高含量的作物營養(yǎng)元素N、P、Corg和有益元素Cu、B等，同時(shí)K2O、Na2O等的含量最低，因此，土壤肥力最好，但應(yīng)廣施鉀肥。
3．在環(huán)境方面，Cr、Cu、Hg、Ni、As、Cd等重金屬元素含量相對最高，標(biāo)準(zhǔn)差又很大，因此局部地區(qū)存在上列重金屬元素環(huán)境質(zhì)量安全威脅。這些有毒有害重金屬元素主要與工業(yè)三廢的排放、農(nóng)業(yè)生產(chǎn)施肥及農(nóng)藥有關(guān)，這就為如何科學(xué)合理開發(fā)利用土地資源提出了新的問題，應(yīng)開展深入的土壤環(huán)境地球化學(xué)研究，倡導(dǎo)合理的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。
4．在資源方面，Au、Ag、Cu、Pb、As元素含量最高，元素組合特征明顯，因此，形成火山裂隙充填型及其次生作用類型的貴金屬或有色金屬礦產(chǎn)可能性較大。
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