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[中圖分類號]R318 [文獻標識碼]C [文章編號]1673-7210（2007）05（c）-130-01
生物醫學研究的主要任務是預防與治療人類的疾病，保障人民健康。它是通過臨床研究和實驗室研究兩個基本途徑來實現的，而不論臨床研究還是實驗室均離不開動物實驗。特別是醫學科學從“經驗醫學”發展到“實驗醫學”階段，動物實驗就顯得尤其重要。動物實驗方法的采用及發展，促進了醫學科學的迅速發展，解決了許多以往不能解決的實際問題和重大理論問題。生理學家巴甫洛夫曾經指出：“整個醫學，只有經過實驗的火焰，才能成為它所應
當成為的東西。”
1 人與動物的異同
目前，大多數人的看法是人與動物既有相同之處，又有不同所在，似乎這是一種很辯證的看法，但這不是一種徹底的辯證看法，實際上，人們必須回答人與動物在生物學上是大同小異或是小同大異？如果動物與人的相同僅僅是個別的、特殊的，那么今天我們進行的大量動物實驗就是一種極大的浪費。
一個阿米巴、一只青蛙與一個人其外表上截然不同，但它們都具有生命最基本的特征，它們都必須通過與外界環境進行物質交換來維持其內環境的相對穩定性，一旦這種穩定受到破壞，就可能造成機能障礙甚至死亡。人與許多動物一樣，是由細胞構成的，這些細胞基本上都由膜、漿、核三部分構成。脊椎動物構成機體的器官基本上是類似的，盡管人體機能的調節比許多動物復雜，但它們的基本調節方式都是神經體液調節。例如：前列腺素不但在人體內存在，而且在低等動物（如柳珊瑚）體內存在，甚至于香蕉里也有大量的前列腺素。正因為許多基本生理過程人與動物是一樣的，所以動物實驗才能對醫學的發展做出貢獻。
2 動物實驗的意義
動物實驗科學發展的最終目的，就是要通過對動物本身生命現象的研究，進而推用到人類，探索人類的生命奧秘，控制人類的疾病和衰老，延長人類的壽命。隨著醫學生物科學突飛猛進的發展，隨著人類基因組逐漸被破譯，動物實驗的重要性愈來愈被人們所認識，它已被認為是人類追求幸福生活的支柱。當前我們正處于世界范圍新技術革命的非常時期，生物工程、微電子技術、新材料和新能源正在突飛猛進地發展，作為生命科學研究的基礎條件――動物實驗，已受到世界各國的普遍重視，這是因為在生物科學領域內，不能用人去實驗，因此我們必須借助動物實驗去探索生命的起源，揭開遺傳的奧秘，攻克癌癥的堡壘，研究各種疾病與衰老的機理。
3 動物實驗在醫學領域的應用
在生命科學中，人類的健康和福利研究離不開動物實驗，在對人的各種生理現象和病理機制及疾病的防治研究中，實驗的動物是人的替難者，比如癌癥是威脅人類健康的最大疾病，由于在腫瘤的移植、免疫、治療等研究中使用了裸鼠、悉生動物和無菌動物的實驗，對各種惡性腫瘤的致癌原因尤其是化學致癌物質、病毒致癌、腫瘤的病毒免疫、治療等方面的研究有了極大的進展，計劃生育研究有相當大的工作是在動物身上工作的。巴甫洛夫條件反射試驗和我國生物學家朱洗的無外祖父的蟾蜍，即由動物實驗進行成功。各種疾病如高血壓、動脈硬化、心臟病、甲狀腺疾病、糖尿病、肺炎、神經系統疾病、畸形、傳染病、外科疾病、免疫疾病等各方面的機理，都經動物實驗加以闡明或證實，因此，有人統計生物醫學的科研課題有60%以上需要動物實驗，有許多課題的研究離開了動物實驗就寸步難行。此外，制藥和化學工業產品如不用動物進行安全試驗，包括三致（致癌、致畸、致突變）試驗，給人類應用將會造成十分嚴重的后果。由此可見，動物實驗在醫學的發展過程中起著極其重要和推動性的作用。
4 動物實驗是醫學發展的客觀需要
自從有了人類以來，就存在一個如何與疾病斗爭的問題，最初在既無醫又無藥的情況下，除了一些迷信方法外，人們最早嘗試的方法可能就是利用天然存在的各種動植物來治病，有些可能成功，有些可能失敗，從神農到李時珍，他們研究的方法基本相似，或是根據以往的臨床實踐，或是親身試驗，他們積累了大量的寶貴的經驗，為醫藥的發展做出了杰出的貢獻，但這種試驗方法既費事又危險。從我國秦漢的“神農本草”記載的369種藥物到李時珍《本草綱目》的1 892種藥物耗費了1 000多年的時間。現在世界上1年新合成的化學藥物近20萬種，即使可以找到這么多自愿受試者，它的代價也高得令人不能接受。這種局面就強迫我們不得不用動物來代替人進行試驗。為了促進醫學事業的發展，我們必須正視過去動物實驗存在的缺點、動物實驗客觀上的困難。總之和臨床觀察一樣，動物實驗的出現是醫學發展的客觀需要。由于種種原因，可造成動物實驗與臨床觀察脫節，但不能構成否定動物實驗的理由。為促進醫學發展，關鍵的問題在于正確處理這個問題，動物實驗應由過去比較注重分析性實驗逐步轉向更多的注重綜合性的實驗，筆者主張在條件許可的情況下臨床也應做一些分析性的實驗。我們應當特別注意分子生物學和遺傳工程學給我們提供的機會，注意在具有多種動物品質的模型進行實驗，當然在進行這一番努力后臨床醫學與動物實驗仍會有重大差別，也正因為如此，醫學研究的這兩種方法將長期存在，不能互相取代。
1動物福利的含義
所謂動物福利，主要是指讓動物在健康快樂的狀態下生存、繁衍、活動，在飼養過程中要保證動物無疾病、無行為異常、無心理緊張等，反對任何形式的屠殺和虐待。動物福利概括起來包括五個方面，一是生理福利，也就是讓動物免受饑渴；二是環境福利，也就是讓動物有生活舒適的住所；三是衛生福利，也就是盡可能地讓動物免受痛苦、傷害和疾病；四是行為福利，也就是要確保動物表達出所有自然行為；五是心理福利，也就是讓動物免受恐懼和不安。
在實驗過程中為了保障動物福利的實施，英國動物學家William和微生物學家Rex Burch于1959年提出了動物實驗的3R原則，從而將動物福利進一步具體化。該原則包括替代、減少、優化三個方面。替代是指在保證實驗效果相同的前提下，用沒有知覺的實驗材料來代替活體動物進行實驗，如組織細胞培養、各種離體實驗或計算機模擬實驗等，或者用低等動物替代高等動物進行實驗。減少是指某一研究方案沒有可行的替代方法時，則應把動物的使用數量降低到實現科研目的所需的最小量。優化是指在必須使用動物進行實驗時,盡量精選實驗動物、技術路線和實驗手段，優化實驗操作技術,減少或減輕實驗過程中給動物造成的損傷、疼痛和不安，使動物實驗得出科學的結果。目前，3R原則已成為實驗動物福利的重要內容，被廣泛應用于動物實驗中。
2基礎醫學動物實驗教學現狀
基礎醫學所屬的生理學、病理生理學及藥理學均為實驗性科學，實驗教學占有重要的比例，其中絕大多數實驗課程要使用實驗動物。由于以往忽視動物倫理學的教育，在實驗教學中筆者發現部分學生對實驗動物福利問題關注了解不夠，常有多用濫用實驗動物、實驗操作不規范給實驗動物造成不必要的惡性刺激等問題出現，而有些實驗過程的設計亦不符合動物福利的要求。例如傳統方法中小鼠的處死常用頸椎脫臼方式，這就給動物帶來了極大的痛苦;還有在離體小腸平滑肌實驗中，為了避免麻醉藥物影響小腸平滑肌的生理活性，實驗人員常采用木槌猛擊家兔腦后枕部使其昏迷，然后實施手術取出小腸，這樣也會給動物帶來不應有的惡性刺激，以上這些實驗方法都有待于完善。
在實驗教學過程中，我們還發現有部分學生抱著樸素的動物保護意識，主張對實驗動物進行無條件的保護，反對使用和接觸實驗動物，亦拒絕學習動物實驗的各項技能，從而使實驗教學無法達到預期的目標。
3動物福利背景下實驗教學改革
3.1在實驗教學與準備中引入3R原則 近年來，3R原則因為其自身的科學性和可操作性巳被廣泛應用于動物實驗中，這一原則不僅可以有效地維護動物福利，還能使動物實驗結果更加準確，實驗費用進一步降低，具有很強的可行性。
在每次動物實驗之前，應對所需實驗動物的數量進行精確計算，即在確保獲得同樣實驗結果的基礎上減少動物數量，盡量避免動物濫用，提高每只動物的利用率。例如在實驗準備時教師要根據實驗人數和分組情況來訂購實驗動物，這樣既能使每位學生都有練習的機會，又不至于浪費動物；對于實驗過程相似的項目，應倡導合并到一起來完成，甚至可以打破傳統上的學科界限，開設跨學科的綜合實驗項目，這樣既減少了動物的使用數量，又使學生對綜合知識有了更加深刻地理解。
以重復性的驗證實驗為主是以往動物實驗教學的一大特點，而現代計算機模擬技術的發展，在一定程度上為3R原則中替代原則的實施提供了可能性。目前，已開發成功的離體蛙心灌流系統、離體小腸平滑肌系統均能很好地模擬觀察各種體液環境及藥物對離體心臟及小腸平滑肌活動的影響。這些模擬系統通過圖片、動畫及音視頻等方式讓學生們在不用實驗動物的前提下來熟悉實驗步驟，了解實驗現象,從而達到實驗教學的目的。而對于必須使用動物的綜合性實驗項目，筆者倡導盡量使用低等的小型動物來做實驗，避免使用高等的大型動物。
優化實驗程序也是減少動物痛苦感的一個重要手段。在實驗開始之前，教師要讓學生做好課前預習或觀看教學錄像，使學生在動手操作前就已充分熟悉動物麻醉、藥物注射、動物解剖等實驗步驟的要求，并在進行實驗之前，向學生講解實驗動物為人類做出的犧牲和貢獻,從而培養學生樹立動物福利的理念，尊重實驗動物的基本權利，在實驗課堂內形成一種強烈的關愛動物的氛圍。在實驗操作中，要正確、溫和地對待動物，杜絕虐待行為。例如抓取、固定動物時要嚴格按照動物福利標準化操作規程（SOP）進行；實施動物手術操作時，應術前麻醉，術后護理，盡量減少動物痛苦。此外，要充分利用無創血壓、心電描記等無創傷手段來進行相關實驗，在保證動物重復使用的同時減輕動物的痛苦。
3.2培養高素質實驗教師 在動物實驗教學中培養學生的動物福利觀念，教師的以身作則尤為重要。作為一名實驗教師，在教授實驗課的同時，還要不斷學習相關學科的知識，包括動物保護立法、動物飼養管理、動物保健救護、動物檢疫防疫、動物行為學等。憑借扎實的理論功底和豐富的實踐經驗，任課教師可以把動物保護、動物福利等理念貫穿到對學生的實驗操作指導中，從而讓學生真切感受到執行3R原則的科學性和必要性，并充分理解保護實驗動物福利不僅是生態哲學的體現，也是實驗結果科學性和可靠性的保證。
3.3生態哲學觀點的普及 通過動物實驗進行觀測，可以獲得真實、科學的結果來驗證生物醫學的假說，而經過多次實驗驗證后得到肯定的假說就可以上升成理論，為破解生命密碼，攻克科學難題奠定基礎。從這一點上說，動物實驗是生物醫學研究的基本途徑和有效手段，而它的存在一定會傷害到用以實驗研究的動物。動物實驗是醫藥專業學生必須掌握的基本技能之一，但一些學生對使用實驗動物存在抵觸情緒，而動物福利的理解偏差往往是，致這種現象出現的主要原因。傳統的學校教育、社會輿論乃至家庭教育都會單純地把施韋茲的“敬畏生命的原則”、辛格的“動物解放倫理原則”等生物中心主義世界觀誤認為是絕對的倫理原則，而忽視了把“人-社會-自然”和諧發展的生態哲學以及發展中人類對生物資源的適度消費和再生利用的世界觀傳授給學生，以致學生出現片面理解動物福利理論的情況。
以生物平等主義為基礎的生物中心論，推崇尊重生命，這種境界對人類的道德完善有所幫助，但這種世界觀缺乏現實的可操作性。在人類社會的發展中，正確而合理地適度利用生物資源（包括動物資源）以滿足人類的適度的、基本的物質需要，并且考慮“人-社會-自然”系統的整體性，使社會、經濟、生態均得到持續發展，這就是生態哲學的理論觀點。由此可見，動物實驗與生態哲學并不矛盾，生物醫學實驗中關注動物福利并不是拒絕使用實驗動物。
在課堂教學中，實驗教師要充分利用生態哲學的上述觀點，讓學生在實驗操作中重新反思動物福利問題，以逐漸消除學生樸素、片面的動物保護觀念。任何“只考慮人的需求”或者“只考慮生物圈的整體性”的觀點，都是不全面的，而科學的、少量的動物資源的利用并不損害生態潛力和生態完整性，關注動物福利也并不是完全、絕對地拒絕使用實驗動物。認識到這一點，學生才能擺脫動物實驗時的擔憂與恐懼心理，在重視動物福利的前提下合理使用實驗動物。
4結語
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關鍵詞 求偶行為 求偶形式 生物學意義
中圖分類號 Q-49 文獻標識碼 E
動物的行為是種群間交流的工具，包括繁殖、取食等行為，在整個生命活動中有著很重要作用。而動物的求偶行為是繁殖行為中的重要環節，又被稱為“求婚”、“求愛”等，也叫前行為，指前雌雄一方為了獲得配偶而盡力展現婚裝及動作而使另一方做出選擇的整個過程。求偶行為作為動物特有的一種本能，包括動物性活動和作為性活動前奏的全部行為，一般起始于動物的期，持續幾小時或幾天，在動物完成過程中結束，最終吸引異性完成。我國對動物的求偶行為方面的研究起始于20世紀90年代，在20世紀初達到，主要涉及鳥類、昆蟲等求偶的形式及特征意義方面的研究。那么動物求偶的形式有哪些呢？這些方式到底有什么生物學意義呢？
1 求偶行為的形式
動物求偶行為是十分復雜的行為系統，包含著豐富、復雜的生物學信息。大多數是雄性主動向雌性求偶，少數相反，如瓣蹼鷸科、三趾鶉科、彩鷸科等。還有雄雌同樣參與求偶，如海鳥，一般外貌鮮明的一方先主動，如果色彩相當則求偶主動性相當。動物沒有“語言”，但求偶形式多樣，千奇百怪，有靠發出復雜的聲音的聲音通訊，有靠展示奇特的動作、炫耀的色彩、建造或裝飾巢穴等的光學通訊，有傳遞信息素的化學求偶，還有特殊的喂食求偶等多種形式，所以研究觀察求偶現象并非易事。下面從四個方面對動物求偶形式進行說明。
1.1 聲音通訊求偶
這種形式常見于存在空間距離使視線受阻的鳥類和視覺欠缺的昆蟲類。鳥類的鳴叫是種群內個體相互溝通的“語言”，具有明顯的節律性變化，期的雄性動物發出自己特有的聲音吸引異性，如杜鵑晨夜鳴叫、貓頭鷹悲鳴、蟬的夏季高歌、蟋蟀徹夜鳴曲等。還有動物借助于外物而發聲求偶，如雄啄木鳥用喙敲擊樹干吸引異性、毛翅目昆蟲打鼓求鳴；北美草原的艾草榛雞在嗉囊中吸入4 kg左右空氣，再通過“砰”的放氣聲響招引雌性。這些動物通過聲音特有的強度、頻率吸引本種異性，并向異性傳達自己的位置、自身的身體質量等情況。
1.2 光學通訊求偶
這種求偶方式多見于外表華麗、身體靈活的鳥類，或者體型較小但會筑巢穴的無脊椎動物或鳥類中，可分為以下幾種。
1.2.1 炫耀求偶
繁殖期間雌雄的一方（通常是雄性）通過體色、羽毛、體型改變，使得體色更突出，羽毛更亮麗，體型更鮮明，從而正面或側面在異性面前炫耀，通常見于鳥類、昆蟲類。如期的公雞通過顯露彩色的羽毛、豎起鮮紅的歡雞冠子母雞面前炫耀；孔雀開屏；黃腹角雉雄性抖動平日藏著的翠藍色肉角；鶴形目鴇科大鴇求偶的雄性身形可以從“u”變為“v”形等。炫耀求偶通過刺激異性的視覺，持續時間長，直到成功。會炫耀的雄鳥往往多妻，這也與它們外表有關。
1.2.2 行為動作求偶
雌雄一方（通常為雄性）舞蹈、戲飛、婚飛或雙方身體接觸、擊喙、親吻、頭頸交纏、身體相依、競技等行為完成，常見于昆蟲、猛禽、水鳥等多種生物。如蝶類戲飛；非洲鴕鳥半蹲半坐并不斷搖晃身體，并把翼、尾羽輪番展示給雌鳥；雄杜父魚等在洞口，咬住經過的雌魚頭部看是否掙扎，不掙扎者則可以；海豹、駝鹿雙雄決斗；雌雄蟾蜍聚集到池塘、湖泊進行配對和產卵；具有血緣關系集體性求偶；雄性火雞結伴求偶卻只有其中一只；還有熱帶大陸的雄性侏儒鳥、歐亞磯鷂在充當求偶助手時，卻最終奪取了領地，自己參與；還有天鵝、鴨子頭頸交纏、身體相依等。這些行為在雌性周圍進行并刺激雌性對自己的選擇，但這種求偶方式高耗能、體重減輕，生命受到威脅，獲勝者才能完成。
1.2.3 建巢穴求偶
一些雄性動物通過建堅固且華麗巢穴吸引異性、完成。如雄性園丁鳥用細枝編織巨大鳥巢，再用鮮花、各種物件裝飾求偶場；雌織布鳥通過觀察雄織布鳥所建鳥巢的堅固程度選擇雄性；沙蟹掘穴，堆成金字塔形顯示自己的位置等。雌性通過巢穴選擇雄性可以給產卵、孵化選擇安全的環境，提高后代成活率。
另外有些雄性動物通過反射紫外線吸引異性，而雌性利用眼底的紫外線敏感細胞做出反應，如熱帶叢林中的安樂蜥、一些蝴蝶等。
1.2.4 化學求偶
一些動物可以向周邊散發一些化學物質，如信息素。性信息素是生物的某一方通過特殊的分泌器官分泌于體外并擴散到周圍環境的微量化學物質，經空氣或其他媒介傳遞到同種異性的感受器，最終引起種群內雌雄相遇并，多見于昆蟲中。已發現有250余種昆蟲可釋放性信息素，大多為雌性釋放，如雌松葉蜂放入籠中置于田間，可招引11 000只雄性松葉蜂。再比如靠氣味吸引異性的雄果蠅；雌螢通過閃光吸引雄螢等。昆蟲能進行信息求偶是因為昆蟲具有發達的嗅覺，對氣味等很敏感。
1.3 特殊的方式――喂食求偶
一些動物為了能有機會與另一方進行，雄性往往攜帶食物給雌性，利誘雌性，減少雌性逃跑或攻擊反應的可能性。有直接獻上食物的，如雄猴獻上野果給雌猴，雄燕鷗叼著鮮魚給雌燕鷗；還有的是避免求偶時被異性吃掉的危險，如雌蜘蛛個大視力差，當雄蜘蛛接近時會被當成食物吃掉，所以雄蜘蛛在求偶時會用絲纏住昆蟲給雌蜘蛛，堵住雌蜘蛛嘴，趁機完成；還有的是雌性吃掉求偶的雄性，如雌螳螂用大鱷咬掉正在的雄螳螂頭部。喂食求偶能增加求偶的成功率，求偶的同時也增加雌性個體的營養和產卵量，但對雄性也有著挑戰性，必須能捕獲到求偶的食物或做好犧牲的準備。
動物求偶形式多樣，而且大多時間并不是用一種方式而是兩種或多種方式綜合進行。如大熊貓通過視覺、嗅覺、聽覺進行傳情；麥頭風雞在空中翱翔和翻滾，露出黑白分明的羽衣；雄性滑北螈的求偶則包括炫耀自己華麗的色彩和用尾擊水，用含有自己氣味的水流震動雌性。無論以哪種方式，本物種或本種群內是固定的，目的都是吸引異性，完成。
2 求偶的生物學意義
動物一切行為都能使自己更好地生存，遵循效率最優原則、進化穩定原則，求偶也不例外，可確保在合適的地點時間和理想的條件下且發生在同種異性之間。求偶行為也滿足達爾文“雄性競爭”、“雌性吸引”的性選擇理論，另外對于求偶，有科學家也提出“生殖中不能獲益的的雌性通過選擇具有優質基因的雄性進行，彌補其在生殖中的利益損失”。求偶行為是多基因控制可遺傳的性狀，在自然選擇和性選擇中承受很大的選擇壓力，表現出趨同或趨異進化。
2.1 吸引并選擇異性
動物通過求偶吸引異性，但成功還取決于同種異性的選擇，這種選擇往往具有優勢的雄性獲勝。同種雌性根據求偶聲音頻率、炫耀時間間隔、行為強烈程度、提供的食物多少等選擇活力旺盛、處于主導地位的雄性，可增加繁殖成功率，給后代留下優良的遺傳基因，使后代具有更強的生命力。雌性選擇雄性的同時，雄性為了得到，會更賣力地以自己特有的形式展示求偶欲望，同種雄性間也會互相干擾和排斥，不惜用武力取得地位。這種選擇與被選擇最終的目的都是吸引異性，完成，保證后代優質優量。
2.2 激發異性性活動
動物的性成熟在同種雌雄中并不是同時完成，往往雄性先表現出性興奮，雄性在期向同種雌性進行的求偶行為，使雌性神經系統和內分泌腺處于積極狀態，使兩性器官發育和性行為發展處于同步，對體外受精的兩棲類、魚類等尤為重要。
2.3 種間特異性
求偶行為發生在同種異性個體之間，雄性能向同種雌性發出特有的信號，同種雌性只識別這種信號并作出反應。如刺蜥屬的雄蜥是靠有節奏的擺頭來吸引異性的，但不同種的雄刺蜥擺頭的速率不同，同種的雌刺蜥能選擇出正確的雄刺蜥。因此，可根據這種特有的信號區分物種。
2.4 推動物種進化
雌性對本種雄性的主動選擇，雄性優勝劣汰，產生的后代生存力更強，如雌性對雄行求偶鳴曲的主動選擇，導致雄性長翅型和短翅型的分化。在雜交帶中雜交個體時優先選擇雜交個體的求偶鳴曲，異域種群在中優先選擇同種求偶。但當求偶行為的變化、發生地理隔離時加速生殖隔離，加快亞種分化，最終形成新物種。
另外，求偶行為長期進化中還出現求偶行騙和性逆轉現象。求偶行騙是動物由于食物不易得但要完成所出現的一種高級求偶現象，多見于喂食求偶的動物中。如雄性的蝎蛉模擬雌蝎接近其他準備求偶而且已經捕獲到食物的雄蝎，騙取食物再向雌性求偶，有的雄蝎甚至把沒有裝食物的“空籃”送到雌蝎面前趁機完成；螢火蟲除對本種雄螢發出的閃光信號作出反應外，還會對其他的雄螢作出應答，待來到身邊將其捕獲、吃掉。性逆轉是那些弱者為避免求偶競爭在受某些條件影響下采取性別轉換，改變自己的不利處境，獲得生殖上的較大成功。如雙翅目搖蚊科某些昆蟲受雨蟲寄生后，卻能從雄蟲變為雌蟲。
動物求偶形式多樣化，對生殖生存有著重要的意義，可用于解決動物生殖中的一些問題。比如可以模擬動物特有的求偶形式刺激那些瀕臨滅絕、對人類有益的生物多產卵，培育出更多適應生存的個體。也可以利用求偶過程，對那些害蟲改變求偶形式，使其不能正常，減少后代的出現，從而減少農藥的利用。總之，動物求偶機制、運用還有很多地方需要研究，今后這將是生態學研究的熱點和難點。
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1 動物的選擇
1．1 動物來源確定 動物來源要選擇國家、省相關部門確定的醫學動物實驗室，其中包括《實驗動物管理條件》、《醫學實驗動物管理實施細則》的規定并取得醫學動物實驗條件的合格證明書。 其要求實驗動物的同種屬、同品系、同月齡、性別雌雄比例。
1．2 熟悉并了解實驗動物 在實驗前，準備階段要到相應動物實驗室對參加實驗的動物進行初步的觀察、了解，主要觀察其生活習性、了解飼養要求等，重點掌握實驗的組織、器官等生理解剖部位、特點、并作初步評估。
2 預實驗
預實驗是對研究技術、方法的訓練，對設計方案的實踐評估，同時可以了解實驗動物對各種處理因素的反應情況，以及在試驗過程中，動物在生理、精神狀態、飼養等方面可能出現的一些問題作以了解，以便在正式實驗過程中作好提前的預防、分析，保證實驗過程的順利實施。
3 實驗方法
3．1 保證動物或預行實驗靜脈的隨機分組 采用抽簽法，在正式實驗前1周對動編號、打印分組，并保證實驗靜脈的完好。
3．2 設置對照組 實驗組、對照組應具有可比性，包括對象、飼養環境與方法，操作、處理因素等。
3．3 設計方案 要根據實驗目的選擇設計方案。
3．4 做好觀察指標的管理 選擇必要的觀察指標，如實驗室檢查、X線、病理、細菌 培養等，記錄結果要擬訂專用表格，必要時建立實驗動物病 歷與檔案，具體項目包括日期、時間、實驗者、取標本者以及樣本的編號排序等要逐一詳實記錄并簽字。
4 實驗效果
動物實驗要消耗一定的人力、物力、財力，所以對整個實驗過程必須周密布置，諸如以上各項做法，盡最大限度地保 障動物實驗的質量。以達到預期的目的。
5 討論與分析
動物實驗盡管有一定的不足，但在人體實驗之前，動物實驗是很重要的醫學研究方法，因此，從事醫療科研人員應該更多熟悉、了解和掌握有關動物實驗的基本知識和技巧，為臨床科研工作做好基礎。
寫下這個題目，我想我是在說一個很不討好的問題。時下，或者好些年來，我們的孩子都被灌以“學以致用”的理念，幾乎所有的教育，都是或者說都宣稱自己是實用的。精致的實用主義，讀得好的，會有好工作、好前程，可以成為人上人。甚至對時下教育的大義凜然的批評，也是說學校的讀本和現實生活脫節，不管學生畢業后能不能找到飯碗。人家是賣了家里的耕牛，才供上孩子讀書的。結果畢業了，還是回家種田去。
這就提出了一個大問題：學校教育到底教什么？我覺得好的大學，就是教無用的東西的。教有用的東西的是專科學校，是技校。有用的東西，是讓你有飯碗，繼而可以養家，甚至可以很富裕。無用的東西呢？是讓你成人的，成為一個可能很高貴的人的。
無用的東西是什么呢？是人和人生的神采、格調、情趣和韻致。你學了嗎？你擁有了嗎？這是個問題。這是教育的問題，是學習的問題，是社會的問題、是你我的問題。
舉個坡的例子。歷來的讀書人，為什么都喜歡坡？坡肯定不是史上最牛的讀書人。即使在唐宋家里，他也不是。他官階不高。原先大家都以為，他和他弟弟蘇轍，兩個都是宰相人選。后來蘇轍是做到了。比蘇轍名氣大的坡呢？卻是屢屢被貶。實際上，可能還真不是宰相的料。比詩文吧，坡也不高人一頭。不說唐代韓柳的文章，即使宋代幾位的文章，光輝的策論、典雅的詞賦，坡也只能算是別開生面的一家。
那么，歷來的讀書人，為什么更加景仰坡，甚至獨獨引坡為知己呢？這里的奧秘，可能就是因為坡學無用的東西最有心得，并且終身沉湎不渝。唐宋家里，除去他的另七位，還有歷代許許多多的大文人，都像蒼松鐵柏，作為社稷和文化精英，他們的文化涵養都是極高的，其中自然也包括對無用的東西的浸。但是他們對無用的東西的用情和用心，似乎都不及坡。
坡是蒼松鐵柏，更是一株古椿，大而無用的古椿。對大而無用的古椿，所有人可以漠不關心，可當你和它面對了，你就會感動、會明白：原來塵世間所有的往事和前程，都可以這么有神采，有格調，有情趣，有韻致。由此，坡走進了所有讀書人心里，也走進了你的心里。
人有貧富之分，更有貴賤之分。貧富之分，是淺層次的。貧富可能是一時，兩者也可以轉換。再說，人生在世，舒坦和快樂的生活，所需的必要開支，其實并不太多。富，自然是好，只是當富成為一種炫耀的時候，那就是一個極貧的狀態了。
人和人生的最終劃分，是貴賤之分。人之所以為人，所以敢在塵世里活過百年，就是因為人在骨子里有一種高貴在。無論貧富，高貴可能屬于每一個人。有了神采、格調、情趣和韻致，就是一個高貴的人。市儈、物欲和極度的實用，讓我們遠離了高貴。低賤，甚至下賤，反而成為一種時興，甚至被爭相效仿。貴賤之分，變得撲朔迷離。而這，肯定不是一個好社會。如果說教育出了問題，也就出在了：大家多不學無用的東西了。當所有人實用地活著的時候，高貴會死去。
在此，我十分懷念歷史上那些高貴的人、高貴的讀書人。那些為家國和天下活得很高貴的人，很高貴的讀書人。還有傳承高貴的那些門第和家族。那些人，那些門第和家族，所留下的無用的東西，對于未來的指引，看起來是無用的。但無用之用，謂之大用。無論世界如何變化，中國人披荊斬棘、山奔海立般走來和前往的曠世高貴，還是這些無用的東西。學一些無用的東西吧，擔當起家國天下。舒坦和快樂地活著，縱使清貧，也要很高貴。
原載《解放日報》
沃國強 薦
1特色專業建設的指導思想
黑龍江八一農墾大學動物醫學專業堅持的辦學理念是以轉變教育教學觀念為先導，以教學改革與教育創新為核心，以教學基本建設為重點，注重質量、開拓創新、突出特色。堅持以“教育要面向現代化、面向世界、面向未來”為指導，全面推進素質教育和創新教育，以技術應用能力和綜合素質培養為主線，實施校企合作與產學研結合的人才培養模式，改革專業教學內容、課程體系及教學方法與手段，加強理論與實踐的結合，構建新的理論教學體系和實踐教學體系，積極探索技術應用型人才的培養規律。
2動物醫學特色專業建設的目標要求
按照2001年國家教育部下發的《關于加強高等學校本科教學質量的若干意見》及黑龍江八一農墾大學“一院一品”建設的要求，深化教學改革，優化人才培養過程，堅持傳授知識、培養能力、提高素質、協調發展，全面推進素質教育，確保本科教學工作的健康發展。黑龍江八一農墾大學動物科技學院動物醫學專業集中力量加強教學基礎建設，培養和引進具有較高水平的專業人才，組建合理的師資梯隊，建立健全教學管理運行和質量監控體系，使動物醫學專業成為黑龍江墾區乃至全省及北方地區重要的動物醫學高級專業技術人才的培養基地和科技成果的產生地、輻射地。
3動物醫學特色專業建設的具體實施措施及方法
黑龍江八一農墾大學動物科技學院動物醫學專業通過國家特色專業點的建設，現已取得良好效果，具體實施措施與方法如下。
3．1師資隊伍建設
擁有一支結構合理、學術水平高、教學科研能力強的師資隊伍是學科建設的根本，也是學科發展是否有潛力的重要標志。動物科技學院動物醫學專業的師資隊伍建設主要是進一步調整師資隊伍結構，使師資隊伍的職稱結構、學歷結構、學源結構和年齡結構趨于合理。實施新的師資培養計劃，以在職提高、出國進修、攻讀學位等多種方式提高教師的業務水平和綜合素質，包括業務水平、職業道德、敬業精神等等。堅持“導師制”，以老帶新，培養青年教師，使其快速成長。
3．2實踐教學基地建設
學科和專業建設要體現動物科技學院動物醫學專業教育“科學性、實踐性”的特點，要進一步加強學院實習基地的建設。建立適應實踐教學需要的實習基地。在具體操作過程中，以實習基地為平臺，以生產實踐為手段，以提高學生實際操作能力為目標，建立多地域、多層次、多類型和多項目的實習基地。目前，學院已與30多個單位和部門建立了友好協作關系，其中有12個單位已經正式懸掛動物科技學院實習基地的牌匾，其余20多個單位也成為動物醫學專業學生實習實踐較為固定的場所。
3．3課程建設
根據現代畜牧業發展的形勢和畜牧生產的需要，堅持“提高課程實用性、更新課程教學內容、優化課程結構、拓寬課程選擇范圍、強化課程體系改革力度”的原則，密切結合本身的特點和社會需求，在原有教學計劃的基礎上進行調整，繼續增加先進、實用的新課程，增加實踐和實驗室操作內容，同時，每年根據社會的需求對教學計劃進行微調，保證教學內容的先進性和實效性。在堅持“厚基礎、寬專業”的同時，突出規模化、集約化的畜牧產業化特點，加大預防獸醫學、臨床獸醫學的比重，加大選修課課源，將生物技術、信息技術、管理科學、系統工程等課程充實到選修課當中，增加實驗環節和有利于操作能力培養的教學內容。在課程體系改革的同時，動物醫學專業也積極開展精品課程建設和名師培養的工作。目前，獸醫病理解剖學、獸醫臨床診斷技術、家畜傳染病學和動物生理學已經成為省級精品課程，另外還有學校精品課程5門。
3．4學科建設
堅持以人才培養為核心，以學科建設為龍頭，以科技創新與推廣為動力，優化學科結構，注重特色學科建設，整合教學科研資源，探索獨具特色的產學研相結合的人才培養模式，堅持“自身提高、加速培養和引進、整體優化”的思路，積極建立素質強、水平高、師德好、結構優的師資隊伍。目前，動物醫學專業的預防獸醫學和基礎獸醫學已經建設成為省級重點學科，動物醫學研究生導師團隊被評為黑龍江省優秀
研究生導師團隊。
3．5重點實驗室建設
動物醫學專業現擁有實驗室面積3200多平方米，下設2個綜合實驗室，即動物基礎實驗室和動物醫學實驗室，在這2個綜合實驗室中又設有10個功能室。動物醫學實驗室現為黑龍江省級重點實驗室，未來的目標是力爭將動物醫學實驗室建設成農業部重點開放實驗室，同時建成2個省級開放實驗室，并要重點建設和完善動物基礎實驗室和獸藥制劑實驗室。
3．6教材建設
加強課程與教材建設的重點是制訂切實可行的、具有先進科學的教學大綱，并進行教學內容與方法的改革，同時建立試題庫，加強課程建設和先進教學技術的應用，積極鼓勵教師制作適于專業的CAI課件，大力推進教育教學改革，在增加教研課題數量的同時，把重點放在提高立項質量和級別上，爭取申請國家級教學研究課題。
3．7學術交流
進一步擴大與國內外高校的合作與交流，帶動學科的建設和發展。要充分利用學院與加拿大阿爾伯塔大學、韓國忠南大學、日本北海道大學的合作關系，加強與加拿大圭爾夫大學、日本高知大學、意大利storti公司、瑞典IBD公司的合作，進一步加強院校、院企之間的學術交流，借鑒發達國家的動物科學學科教育發展和學科建設的經驗。通過雙方交流、技術合作、專家互訪等途徑，促進學科和專業建設。
3．8科學研究工作
在科學研究上，堅持科學研究與人才培養緊密結合，堅持科學研究與生產需要緊密結合，面向經濟建設主戰場，以黑龍江省墾區規模化、集約化和現代化的大農業為研究對象，以應用性研究為主開展特色鮮明的科學研究，以此帶動學院整體科研工作的水平和質量。根據黑龍江省墾區和區域農業發展戰略需要，瞄準科技前沿，努力建設具有我國現代化大農業特點的規模化、集約化、產業化和現代化的北方寒區現代養殖業科技創新體系。在積極開展家畜家禽疫病普查、疾病防治等應用技術研究、開發和推廣的同時，大力加強基礎應用研究，促進科技成果轉化，不斷提高科技創新能力。把動物科技學院動物醫學專業建成墾區、黑龍江省乃至國家解決經濟建設、科技進步和社會發展及“三農”問題的技術研究基地。
1．1研究對象
學院2012級動物醫學專業共有4個班，隨機選取2個班為實驗組(共57人)，2個班為對照組(共56人)。兩組學生均為2012年全國高考統一錄取的學生，他們在平均年齡、入學成績和基礎課成績間均沒有明顯差異。
1．2研究方法
兩組學生動物免疫學實驗課程的教學大綱、實驗學時、實驗項目、實驗教材、實驗場所、實驗資源、任課教師均相同，對照組采用傳統教學法，即以教師集中講授與示教、學生分組練習、教師巡回指導的方式進行。實驗組采用“任務教學法”，以酶聯免疫吸附試驗為例，其具體實施過程如下。
1．2．1任務準備
實驗教師首先向學生介紹酶聯免疫吸附試驗的定義和重要性，指出該項目的實驗目的、實驗重點、難點，然后安排具體任務，介紹完成任務的途徑及最后的評價標準，對組長及成員的職責提出具體要求。安排的具體任務為:1)酶聯免疫吸附試驗的原理;2)酶聯免疫吸附試驗的分類及其用途;3)開展間接酶聯免疫吸附試驗的基本材料與試劑;4)間接酶聯免疫吸附試驗的操作步驟;5)進行間接酶聯免疫吸附試驗過程的注意事項;6)分析本組實驗結果與實驗體會。
1．2．2任務實施階段
上實驗課前一天，讓學生們通過小組成員之間討論，計劃出實驗所需的材料與試劑，在實驗指導教師的輔助下進行實驗準備。課堂上，由實驗指導教師隨機指派一位學生代表圍繞實驗任務進行講解，其余學生根據講解內容進行討論、交流。根據學生講解與討論的情況，實驗指導教師進行針對性地點評與總結，更正錯誤和補充不完整的內容，并對實驗相關的重點知識進行歸納總結，然后學生開始做實驗。
1．2．3任務評價
實驗結束后，學生根據實驗結果和實驗過程中出現的情況，進行再次分析、討論與思考，對本次實驗進行總結，并以實驗報告的形式體現出來。
2教學效果評價
2．1實驗平時成績評價
根據學生上交的實驗報告中體現的學生分析、解決問題的能力判定實驗報告成績，作為平時成績，用統計學的方法比較兩組學生的平時成績。實驗組學生的優秀率和及格率均顯著高于對照組。
2．2實驗考核成績評價
實驗教學結束后，實驗組和對照組同時進行實驗考核，用統計學的方法比較兩組學生的實驗考核成績，見表2。通過表2可以看出，實驗組考核成績中優秀率和及格率均顯著高于對照組。
2．3教學效果評價
實驗教學結束后，通過調查問卷的形式，在實驗組中進行實驗效果調查評估。從任務教學法效果評價(見表3)可以得知，大部分學生均能接受任務教學法，且認為該教學方法能活躍課堂氣氛、激發學習興趣、能提高學習的參與性和創造性、能培養分析問題和解決問題的能力、可提高團隊合作能力，并可提升綜合能力。
3討論
目前，人們對DNA疫苗的表達水平和免疫原性以及接種途徑、佐劑等多方面進行了廣泛的研究，應用于臨床的DNA疫苗卻很少，主要原因是由于大部分DNA疫苗的免疫效果不盡人意，但伴隨著生物技術的不斷發展，DNA疫苗必定能在未來的疫苗研制中扮演舉足輕重的角色。
1DNA疫苗的特點
1.1DNA疫苗的優點
DNA疫苗相對于滅活疫苗，其最大優點就是可以攜帶不同的保護性抗原基因，構成多價或多聯疫苗。病毒感染機體時，體內產生的抗體一部分可以和病毒中和，使其失去感染細胞的能力，另一部分抗體卻發揮相反的作用，它們協助病毒感染細胞，這就是所謂的抗體依賴性增強作用，滅活疫苗同樣具有這樣的特點，因而在很多情況下導致免疫失敗，甚至出現注射了疫苗加快發病的現象。DNA疫苗可以人為地去掉非保護抗原，避免抗體依賴性增強作用的出現。DNA疫苗的研制還可以根據質粒載體的特點，在調控元件下插入同種病原不同血清型的抗原基因，形成多價苗，也可以插入不同病原的抗原基因，形成多聯苗，這就是所謂的“萬能疫苗”。
DNA疫苗不僅能誘導體液免疫，更重要的是產生強有力的細胞免疫，此外，DNA疫苗不受母源抗體的影響，有可能成功地用于幼齡動物乃至新生動物的免疫接種，可廣泛用于許多疾病的早期預防，這些都是滅活疫苗不可比擬的。
DNA疫苗相對于弱毒疫苗，DNA疫苗只含部分病原體基因組序列，不會因病原體毒力回升而導致疫苗毒的散播。
1.2DNA疫苗的缺點
盡管DNA疫苗有很多傳統疫苗無法比及的優點，但它同樣也有缺點，除了DNA疫苗由于表達抗原單一而表現的免疫效果較差外，主要在安全問題上令人擔憂。美國FDA在關于DNA疫苗安全性問題上，提出應注意DNA疫苗的局部反應原性和全身毒性、遺傳毒性作用、生殖毒性以及致腫瘤性四個方面。WHO在《關于DNA疫苗質量保證指南》中也要求DNA疫苗的研制必須考慮其特殊的安全性問題，主要包括：①可能導致插入性誘變，即質粒載體和外源基因是否會整合進入宿主的基因中；②外源性蛋白長期表達可導致免疫病理，即長期表達外源抗原可能產生機體產生免疫耐受、自身免疫病、過敏反應、超免疫力或自身攻擊。③與細胞因子合用可能導致的其他風險；④表達抗原的載體自身可能有其他生物活性。
此外，DNA疫苗所用載體大部分攜帶抗抗生素基因，這些基因有可能會被其他病原所轉化，形成耐藥病原，這樣造成的“基因污染”對人類社會的確是一種很大的威脅。
2DNA疫苗的免疫機制
目前對DNA疫苗免疫機理的研究仍在探討中，一般認為，DNA疫苗在接種后，機體對其加工處理過程與病毒感染的自然過程相似，抗原提呈過程也相同。首先，注射部位的組織細胞（如肌細胞、上皮細胞和粘膜細胞）、抗原遞呈細胞（APC）或其他炎性細胞將部分質粒攝取，未被攝取的游離DNA大多數被DNA酶降解，少數可能隨循環系統而進入淋巴結或脾中；然后，質粒DNA分子在攝取細胞的核內轉錄為mRNA，再被移至細胞質內翻譯成抗原蛋白分子。這些抗原蛋白分子有的被分泌到細胞外，有的結合到細胞膜上或局限于細胞漿內。分泌出細胞外的抗原蛋白分子最終通過胞飲或吞噬作用方式被APC捕獲，APC將捕獲的抗原蛋白分子進行加工處理，再將處理后的抗原肽遞呈給T細胞，啟動免疫反應。免疫應答啟動后，引發細胞毒性T細胞（CTL）應答，殺死表達外源抗原的肌細胞，使那些沒有分泌到細胞外的抗原蛋白分子釋放出來，再由APC捕獲，啟動隨后的免疫反應。釋放到細胞外的抗原蛋白分子除了被APC捕獲外，也可被B細胞識別，從而激活B淋巴細胞產生抗體，這樣就誘導了機體的細胞免疫應答和體液免疫應答。
3影響DNA疫苗免疫效果的因素
3.1目的基因的選擇
目的基因即DNA疫苗表達的抗原蛋白基因，它的選擇非常關鍵，首先要求是表達出的蛋白分子誘導機體產生的抗體能與病原發生中和反應，即為保護性抗原基因；其次考慮考慮它是否含有密碼子，有無內含子以及是否能在哺乳動物細胞中正確剪切等問題；最后，要考慮單一目的基因是否能起到保護作用，是否需要構建多基因表達載體或分別構建表達載體。
3.2載體及啟動子的選擇
在臨床試驗中，用不同的質粒載體表達同一段基因，往往會有不同的結果，除了個體差異和接種途徑的因素外，載體的選擇是非常重要的。用作DNA疫苗的載體要求是首先在哺乳動物細胞內能高水平地表達目的基因，其次本身不復制，不會整合到宿主染色體中，滿足這兩點才可以應用。決定載體在體內表達的因素，一方面是載體自身序列，不同的載體所含的酶切位點也不同，進入機體后降解的程度也有差異；另一方面與啟動子有關，控制外源基因表達的啟動子對載體的影響最大。目前DNA疫苗中所用的質粒載體均含有真核生物啟動子，如呼吸道合胞病毒(RSV)，SV40和CMV的啟動子以及人b肌動蛋白啟動子等，啟動子的選擇主要是考慮其強弱和來源，根據其來源，啟動子有組織特異性，在各種組織中，起始mRNA合成的效能也不同。
3.3佐劑的應用
目前，應用于DNA疫苗的佐劑類型較多，有細胞因子、趨化因子、協同刺激分子、脂質體、寡脫氧核苷酸、補體分子以及霍亂毒素等佐劑。最常用的為細胞因子，如TNF、GM-CSF、IFN以及IL-2、IL-4和IL-12等，在與核酸疫苗共同接種時，常能明顯提高體液和細胞免疫反應。趨化性細胞因子是一種新型智能型疫苗佐劑，能通過募集特定細胞誘導調節針對DNA疫苗或腫瘤抗原誘發的特異性免疫反應，例如TCA3、MIP（炎性因子）等。協同刺激分子是淋巴細胞識別APC提呈的抗原過程中的一系列輔助分子，如B7/CD28、CD40-CD40L等就屬于這種輔助分子。脂質體是人工制備的類脂質小球體，可以包裹DNA疫苗進入細胞，減少降減。寡脫氧核苷酸是一種免疫刺激DNA序列，能直接激活B細胞、樹突狀細胞、巨噬細胞、抗原提呈細胞等，間接激活T細胞、NK細胞，誘導以Th1型為主的免疫應答，是一種高效低毒的新型免疫佐劑。補體分子佐劑如C3d，是補體系統中補體C3的裂解產物之一，可通過特異性補體受體2（CR2/CD21）將抗原信號提供給免疫細胞，增強特異性免疫應答。近年發現霍亂毒素是一種良好的核酸免疫佐劑，Arrington等將編碼霍亂毒素和大腸桿菌不耐熱腸毒素的A和B亞單位克隆入兩個表達載體，與核酸疫苗一起以粒子介導的方式免疫動物的表皮，發現明顯的增強了針對多種病毒抗原的TH1型細胞免疫，此外，TH2型免疫應答也增強。
免疫佐劑的使用，使DNA疫苗的應用趨于成熟，新型的低成本高效DNA疫苗佐劑仍然是目前研究的熱點。
3.4接種途徑和劑量
DNA疫苗的接種途徑會直接影響其免疫效果，根據DNA疫苗的免疫機制，它在機體主要是進入肌細胞、上皮細胞和黏膜細胞等中表達，從而發揮作用，故接種的部位也是選擇富含這些細胞的位置。有研究比較了經肌肉、靜脈、鼻腔、真皮、皮下和腹腔等不同途徑接種DNA疫苗（甲型流感病毒HA基因）后的免疫效果，結果除腹腔注射外，都產生了一定保護作用，但以肌肉和靜脈注射效果最好，肌肉攝入和表達DNA的能力比其它組織高100～1000倍。目前多選擇肌肉多點注射，或肌肉注射與皮下、鼻腔免疫相結合的方式進行免疫，效果相對較好。
比較注射方法，基因槍接種比直接注射核酸疫苗效果好甚至上幾千倍，但操作相對煩瑣，臨床中不易實現。
3.5機體自身因素
由于動物個體之間的差別，相同的DNA疫苗采用相同的接種方式也會出現不同的免疫效果，有的甚至出現免疫耐受的情況，不過這種現象只出現在部分個體中。作者認為，機體自身因素導致DNA疫苗免疫效果各異的最主要原因卻是機體與疫苗之間的相互作用，主要是指體內局部位置含有的DNA降解酶是否會對DNA疫苗載體以及目的基因發生破壞作用，體內是否會對DNA疫苗產生RNA干擾效應，導致外源基因表達沉默，這是我們以后研究的一個重點方向，也可能是DNA疫苗免疫效果不確實的最主要原因。
4DNA疫苗在動物醫學中的應用
鑒于DNA疫苗的優越性，國內外學者對各種細菌、病毒、寄生蟲的DNA疫苗進行了大量研究，并在預防畜禽傳染病中取得了良好效果，有的已步入臨床應用階段，為動物疫病的防控又注入了新的血液。下面簡單介紹動物用DNA疫苗的部分情況。
4.1應用于禽類的DNA疫苗
DNA疫苗已廣泛用于禽流感、新城疫、雞馬立克氏病、雞傳染性喉氣管炎、雞傳染性法氏囊病、雞傳染性支氣管炎以及鴨乙肝等禽類病毒性疾病的預防性研究，根據病毒的不同，選擇不同的保護性抗原基因，并分別取得了不同的免疫效果。
4.2應用于豬的DNA疫苗
研究最多的最數豬呼吸與繁殖綜合征病毒（PRRSV）DNA疫苗，大多數人選擇幾個結構蛋白基因作為保護性抗原基因，免疫效果也不盡相同。豬口蹄疫、豬流感、豬瘟、偽狂犬病等疾病的DNA疫苗研究也十分火熱，針對不同疾病的DNA疫苗也呈現不同的保護作用，但遺憾的是能應運于臨床中的DNA疫苗卻少之又少。
4.3應用于其他動物的DNA疫苗
有學者發現用gD質粒DNA疫苗免疫新生犢牛，不受母體母源抗體的影響，免疫效果很好。對牛呼吸道合胞體病毒（BRSV）的DNA疫苗的研究也取得一定進展，免疫了含有BRSV重組C基因的質粒DNA的牛，在BRSV攻擊后，病毒量顯著減少。
此外，狂犬病、犬細小病毒、犬瘟熱、貓白血病、貓免疫缺陷等疾病的DNA疫苗研究也都取得了一定進展，有的研究進行了攻毒試驗，有的沒有攻毒，卻也能檢測到較強的細胞免疫應答和中和抗體，這對獸醫工作者來說，無疑是一種喜訊。
5小結
目前，盡管DNA疫苗的作用機理還不十分清楚，它的安全性還有待于進一步研究，但它的潛在優勢已不容置疑。在人類臨床上，已用于部分腫瘤及非感染性疾病的基因治療，動物臨床上，DNA疫苗也日益顯示出它的優勢，尤其是針對各種病毒感染性疾病，研究與應運的也越來越多，它無疑比傳統疫苗更具有優勢，相對重組病毒疫苗則更具安全性。但DNA疫苗免疫效果相對較差是扼制其發展的一個瓶頸問題。從影響DNA疫苗免疫效果的因素中尋找原因，多數的研究只是把佐劑的選擇作為重點去探索，很少考慮到疫苗與機體的相互作用。
1 DNA疫苗簡介
DNA疫苗又稱核酸疫苗或基因疫苗,是編碼免疫原或與免疫原相關的真核表達質粒DNA(有時也可是RNA),它可經一定途徑進入動物體內,被宿主細胞攝取后轉錄和翻譯表達出抗原蛋白,此抗原蛋白能刺激機體產生非特異性和特異性2種免疫應答反應,從而起到免疫保護作用。
2 DNA疫苗的應用
(1)偽狂犬病病毒(PRV)將編碼PRVgC或gD基因的質粒DNA免疫豬,能誘導保護性抗體的生成和細胞免疫的產生;將編碼gB、gC、gD的多種質粒DNA混合使用,對引導免疫反應更有效(Gerdts V等,1997;Rooij E M等,1998)。
(2)豬流感病毒(HIV)Mackling等(1998)的試驗結果表明,編碼HIV1株的血凝素(HA)和核衣殼蛋白(NP)質粒DNA用金顆粒包裹,以基因槍轟擊豬的表皮進行免疫后,HA質粒DNA能使豬產生粘膜免疫反應而對流感病毒的攻擊具有抵抗力,DNA疫苗引起的免疫反應與滅活疫苗相當。
(3)豬呼吸與繁殖綜合征病毒(PRRS)PRRS基因片段ORF5編碼的主要囊膜糖蛋白GP5是該病毒的3個主要結構蛋白之一。含有ORF5基因質粒DNA能誘導豬抗GP5特異性中和抗體的產生;且免疫豬的外周血單核細胞在GP5重組蛋白存在時能夠發生轉化反應,顯示了GP5特異性細胞免疫的產生(Pirzadeh B等,1998)。
(4)口蹄疫病毒(FMDV)將FMDV全長基因組的cDNA克隆到質粒,并去除其編碼核衣殼蛋白VP1的細胞結合部位的DNA序列,構建成質粒DNA以肌肉或皮內注射,初次免疫后2~4周,可使所有的豬都產生特異的病毒中和抗體,攻毒試驗中呈現部分保護作用(Ward G等,1997)。
(5)豬瘟病毒(CSFV)余興龍等(2000)構建了CSFV主要保護性抗原E2基因4種不同的真核表達質粒。小鼠免疫試驗結果表明,E2基因上不同的功能區對基因疫苗的免疫應答有很大影響,有信號肽序列的E2基因可誘導特異性的免疫反應,且無跨膜區序列的E2基因所誘導的免疫應答反應比有跨膜區序列的強,而無信號肽序列的E2基因所誘導的免疫應答反應比有跨膜區序列的強,而無信號肽序列的E2基因則不能誘導產生CFSV特異性的免疫反應。攻毒保護試驗結果表明,免疫家兔最少可抵抗10個最小感染劑量(MID)的豬瘟兔化弱毒苗(HCIV)的攻擊;免疫豬可抵抗致死劑量的CFSV石門株強毒的攻擊。
(6)牛呼吸道合胞體病毒(BRSV)用BRSV G基因構建的DNA疫苗,以無針方式免疫小牛時比皮內或肌肉注射引起的免疫反應強烈。
(7)牛皰疹病毒(BHV)用表達BHV 1 gD基因的質粒DNA疫苗免疫牛,能產生很高的中和抗體;攻毒試驗后發現,免疫組比非免疫組的病毒排放量明顯減少(schrijver R S等,1997)。此疫苗通過肌肉或皮內注射均可引導免疫反應的產生。但皮內注射引起的免疫反應更強(孟松樹等,2000)。
(8)牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)以表達BVDV1型主要糖蛋白E2的質粒DNA肌肉注射小牛,可產生病毒中和抗體和抗原特異的細胞增殖反應;免疫后16周進行攻毒試驗,發現免疫牛能產生針對BVDV1型和2型的血清中和抗體強烈的記憶抗體反應,對牛有部分免疫保護作用(Cox G J等,1993)。
(9)新城疫病毒(DNV)Sakaguchi等(1996)將NDV F基因插入質粒載體,F基因的表達受巨細胞病毒早期增強子和雞β肌動蛋白啟動子控制。1周齡試驗雞肌肉內注射重組質粒后,有2/5注射線性質粒的雞和4/5注射線性質粒與脂質體轉染劑混合物的雞產生了高水平針對F蛋白的抗體,而注射閉環狀質粒的雞不能產生抗體。
